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ELISA法測定單克隆抗體的效價的操作步驟2016/8/2
一、實驗?zāi)康?、深入了解elisa法測定抗體效價的原理。2、掌握ELISA法測定單克隆抗體效價的方法。二、實驗原理ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來...
各種組織切片方法的操作步驟和應(yīng)用范圍2016/8/1
組織切片伴隨著顯微鏡技術(shù)和免疫實驗等的發(fā)展已經(jīng)得到廣泛的認(rèn)同和應(yīng)用。其中各種組織切片方法的操作步驟和應(yīng)用范圍各不相同，本文對其中的石蠟切片、蘇木精染色、結(jié)締組織染色等方法進(jìn)行介紹。(一)常規(guī)石蠟切片的...
免疫共沉淀實驗成功3大關(guān)鍵2016/8/1
一、總結(jié)的成敗因素：1.有效裂解細(xì)胞。2.恰當(dāng)選擇處理樣本的方式：超聲或酶處理。3.選用適當(dāng)適量抗體。4.恰當(dāng)設(shè)置對照。5.不要過分交聯(lián)DNA-蛋白質(zhì)。6.交聯(lián)所用的甲醛終濃度約為1%，交聯(lián)時問需要預(yù)...
實驗室常用6種耐熱DNA聚合酶總結(jié)2016/7/29
耐熱dna聚合酶多應(yīng)用在PCR技術(shù)中。各種耐熱DNA聚合酶均具有5'-3'聚合酶活性，但不一定具有3'-5'和5'-3'的外切酶活性。3'-5'外切酶活性可以消除錯配，切平末端;5'-3'外切酶活性可...
限制性內(nèi)切酶常見問題及注意事項2016/7/29
1)購買的限制性內(nèi)切酶帶有兩種不同的酶切緩沖液，該用哪一種?每種限制性內(nèi)切酶帶有一管酶的zui適反應(yīng)液(通常是一種4-CORE反應(yīng)液)，可能還帶有一只MULTI-CORE反應(yīng)液。2)4-CORE酶切緩...
蛋白質(zhì)的定量法與標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備2016/7/28
A.Folin-phenol(lowrymethod)定量法此法以Biuret方法反應(yīng)為基礎(chǔ)發(fā)展而起，因此會嚴(yán)重干擾Biuret測定方法的因子都會影響此測定法的準(zhǔn)確度。這些干擾因子包括：含-CS-NH...
細(xì)胞凋亡的幾種檢測方法2016/7/28
細(xì)胞凋亡的幾種檢測方法：一、形態(tài)學(xué)觀察方法1、HE染色、光鏡觀察：凋亡細(xì)胞呈圓形，胞核深染，胞質(zhì)濃縮，染色質(zhì)成團塊狀，細(xì)胞表面有“出芽”現(xiàn)象。2、丫啶橙(AO)染色，熒光顯微鏡觀察：活細(xì)胞核呈黃綠色熒...
質(zhì)譜的試劑用品、實驗操作、儀器和樣品選擇方法2016/7/27
質(zhì)譜法在蛋白分析鑒定等實驗中具有不可忽視的作用，本文對其中的樣本制備試劑用品、實驗操作、質(zhì)譜儀的選擇、樣品的選擇等方面進(jìn)行詳細(xì)的介紹。另外，這方面的FAQ、等信息可點擊藍(lán)色的字體查看。試劑耗材：Mil...
如何選擇合適的蛋白含量測定方法2016/7/27
對許多實驗來說，確定蛋白樣品濃度是至關(guān)重要的。如果在2D電泳中，蛋白過多或過少，產(chǎn)生的后果都將是相當(dāng)嚴(yán)重的。大多數(shù)蛋白樣品可通過比色測定法定量。在典型的蛋白測定中，化學(xué)試劑加入到蛋白樣品溶液里產(chǎn)生顏色...
Western Blot試劑的準(zhǔn)備配方大全2016/7/26
WesternBlot試劑的準(zhǔn)備配方大全:1.30%儲備膠溶液：丙烯酰胺(Acr)29.0g亞甲雙丙烯酰胺(Bis)1.0g混勻后ddH2O，37℃溶解，定容至100ml，棕色瓶存于室溫。2.4×分離...
Western實驗中內(nèi)參基因的選擇及使用方法2016/7/26
westernBlot實驗常用于檢測蛋白表達(dá)量、蛋白表達(dá)產(chǎn)物的正確性等。相對于其他檢測蛋白的方法而言WesternBlot實驗在蛋白的定性定量分析、與目的蛋白量的比較方面更簡單一些。雖然，順利的時候W...
冰凍切片的免疫組化染色操作步驟2016/7/25
冰凍切片的免疫組化染色操作步驟：1.新鮮組織立即在恒冷冰凍切片機內(nèi)切片(也可-80℃保存)，厚度為5～6μm。2.載玻片可不打底，裱片后，立即用電吹風(fēng)吹干。3.如不馬上染色，可密封后-20℃保存。4....
膠體金標(biāo)記實驗的操作方法與步驟2016/7/25
膠體金標(biāo)記實驗的實驗過程主要包含以下步驟：膠體金標(biāo)記蛋白的制備及其與膠體金之間的用量比例的確定、膠體金和蛋白的結(jié)合、膠體金標(biāo)記蛋白的純化與質(zhì)量檢測等。1、蛋白質(zhì)的處理：膠體金標(biāo)記蛋白的制備膠體金對蛋白...
免疫熒光雙標(biāo)實驗操作方法與注意事項2016/7/22
在同一組織細(xì)胞標(biāo)本上需要同時檢測兩種抗原時，需進(jìn)行雙重?zé)晒馊旧?。雙重免疫熒光標(biāo)記法(doubleimmunofluorescencelabelingmethod)也分為直接法和間接法。(1)直接法雙重...
免疫組化中可能遇到的問題解決2016/7/22
1、石蠟切片和冰凍切片的比較?(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片，這是請教得出的結(jié)論。因為作石蠟切片時要高溫烤片，可能會破壞組織的抗原性，如果組織的抗原性較穩(wěn)定，則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切...
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