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RAW 264.7單核巨噬細胞白血病

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更新時間:2016-07-18 06:18:39瀏覽次數(shù):489次

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RAW 264.7單核巨噬細胞白血病ATCC株?詢價

RAW 264.7單核巨噬細胞白血病上海谷研科技有限公司的原代細胞株及血清,ATCC細胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清,優(yōu)等胎牛血清,標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清,gibco特優(yōu)級胎牛血清血清,新生牛血清。
細胞術(shù)檢測樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體)RAW 264.7單核巨噬細胞白血病
(1) 收集1×106個細胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞,800rpm離K 心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個細胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
(4) 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
(1)收集2×106個細胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
(5)加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞;固定待測。
(7)流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。
細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測樣本制成單細胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時。
(3)調(diào)整細胞濃度為106細胞/毫升,取1毫升細胞懸液,用PBS洗三次,細胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產(chǎn)品:
L-CYSTINE DIETHYL ESTER DIHYDROCHLORIDE  583-89-1
Leather Cyclohexanol  
Lecirelin Acetate LECIRELIN 61012-19-9
Soybean Lecithin * 8002-43-5
LECITHIN 大豆卵磷酯 8030-76-0
Lecozotan  434283-16-6
LeMon Bioflavonoids coMplex 生物類黃酮 61788-55-4
L-HoMoserine hydroChloride L-高*鹽酸鹽 196950-52-4
Lignin Kraft  110152-58-4
LIGNIN PEROXIDASE  42613-30-9
LIGNIN, ALKALI 堿性木素 8068/5/1
LIGNIN, ALKALI, 2-HYDROXYPROPYL ETHER  88402-77-1
LIGNIN, HYDROLYTIC  8072-93-3
LIGNIN, ORGANOSOLV  8068/3/9
LIGNIN, ORGANOSOLV, ACETATE  86855-54-1
LIGNINE 木質(zhì)素,脫堿的 9005-53-2
ligustilide 藁本內(nèi)酯 4431-01-0
Linaclotide 利那洛肽 851199-59-2
Linagliptin 利拉利汀 668270-12-0
lincoMycin HCL Monohydrate USP 鹽酸*(一水物) 7179-49-9
Linezolid 雷奈佐利 165800-03-3
Linoleic acid * 60-33-3
Lipase froM PseudoMonas fluorescens 脂肪酶 9001-62-1
LIPOTEICHOIC ACID 中文名稱暫缺 56411-57-5
細胞凍存
1.將細胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準(zhǔn)備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi)。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。

SMC-1胸膜細胞瘤

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QGY-7701肝癌細胞

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