NCI-H446 [H446]小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）NCI-H446 [H446]小細(xì)胞肺癌細(xì)胞：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞NCI-H446 [H446]小細(xì)胞肺癌細(xì)胞，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測(cè)即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測(cè)。
（7）流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
1H-BenziMidazole-4-carboxylicacid,Methylester（9CI） 1H -苯并[D]咪唑- 4 -羧酸甲酯 37619-25-3
1H-benzo[d]iMidazol-5-ylboronic acid 1H-BENZO[D]IMIDAZOL-5-YLBORONIC ACID 1228183-22-9
5-hydroxy BenziMidazole 1H-苯并咪唑-5-醇 41292-65-3
COBRATEC（R） 122 1H-苯并三唑-1-基-N,N-二（2-乙基己基）-4-甲基甲胺 80584-90-3
1-Hexanethiol,6-aMino-, hydrochloride （1:1） 6-氨基-1-巰基己烷鹽酸鹽 31098-40-5
1H-IMIDAZO[4,5-B]PYRAZINE  273-94-9
1H-iMidazol-2-aMine 2-氨基咪唑硫酸鹽 42383-61-9
1-HEPTEN-3-OL 1-庚烯-3-醇 4938-52-7
英文名稱 中文名稱 CAS號(hào)
10-HydroxycaMptothecin 10-* 19685-09-7
10-HydroxycaMptothecin 10-* 64439-81-2
10-Hydroxydecanoic acid 10-羥基癸酸 1679-53-4
10-Keto DextroMethorphan  57969-05-8
Sucrose octasulfate sodiuM salt 蔗糖八硫酸酯鈉 74135-10-7
3-HEXYN-1,6-DIOL  85655-98-7
10-Methylacridin-10-iuM-9-aMine broMide  64046-88-4
10-Methylundecanoic acid 10-甲基十一烷酸 2724-56-3
NEOXANTHIN 新黃質(zhì) 14660-91-4
10Mg 阿江欖仁酸 465-00-9
2,6,10-TRIMETHYLDODECANE  3891-98-3
11-AMinoundecyltriethoxysilane 11-氨基十一烷基三乙氧基硅烷 116821-45-5
1-10g  
115571-66-9  115571-66-9
11-ALPHA-HYDROCORTISONE 11- 566-35-8
11b-Hydroxyandrost-4-ene-3,17-dione 11b-羥基-雄甾-4-烯-3,17-二酮 564-33-0
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。