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NG108-15 108CC15 小鼠神經(jīng)細胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細胞

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更新時間:2016-07-13 18:59:51瀏覽次數(shù):520次

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NG108-15 [ 108CC15 ]小鼠神經(jīng)細胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細胞ATCC株?詢價

NG108-15 [ 108CC15 ]小鼠神經(jīng)細胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細胞上海谷研科技有限公司的原代細胞株及血清,ATCC細胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清,優(yōu)等胎牛血清,標準胎牛血清,gibco特優(yōu)級胎牛血清血清,新生牛血清。
細胞術(shù)檢測樣品制備方法
直接標記抗體(FITC標記抗體)NG108-15 [ 108CC15 ]小鼠神經(jīng)細胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細胞
(1) 收集1×106個細胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞NG108-15 [ 108CC15 ]小鼠神經(jīng)細胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標記抗體(5×105個細胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
(4) 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。[2]
未標記抗體間接免疫熒光標記法:
(1)收集2×106個細胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復一次。
(5)加入熒光標記(FITC)標記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞;固定待測。
(7)流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。
細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測樣本制成單細胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時。
(3)調(diào)整細胞濃度為106細胞/毫升,取1毫升細胞懸液,用PBS洗三次,細胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產(chǎn)品:
3-Pyrrolidinol 3-羥基吡咯烷 40499-83-0
Bezafibrate * 41859-67-0
2,3,4,6-TETRA-O-BENZYL-A-D-GLUCOPYRANOSYLBROMIDE  4196-35-4
3-(DiMethylaMino)-1-propanethiol 3-(二甲基氨基)-1-丙硫醇 42302-17-0
2-Phenylacetoacetonitrile 2-苯基乙?;译?nbsp;4468-48-8
ALLANTOIN BIOTIN **鹽 4492-73-3
(1R,2R)-(-)-2-Ami-phenyl-1,3-propanediol (1R,2R)-(-)-2-氨基-1-苯基-1,3-丙二醇 46032-98-8
N,N-Dimethylformamide dimethyl acetal N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛 4637-24-5
tribromonitromethane 硝溴仿 464-10-8
OLEANDRIN 歐夾竹桃甙丙 465-16-7
Orphenadrine citrate 枸酸芬那君 4682-36-4
ocinobufagin 遠華蟾蜍精 472-26-4
beta-EudesMol beta-桉葉醇 473-15-4
ISOTHIPENDYL 氮異丙嗪 482-15-5
(R)-2,4-dihydroxy-N-[3-[(2-Mercaptoethyl)aMino]-3-oxopropyl]-3,3-diMethylbutyraMide 泛硫醇 496-65-1
2-BROMO-1-(2-BROMO-PHENYL)-ETHANONE 2-溴-1-(2-溴苯基)乙酮 49851-55-0
2,3-DibroMo-1,4-diMethoxybenzene 1,4-二甲氧基-2,3-二溴苯 5030-61-5
TRANS-1,3-PENTADIENE 間戊二烯 504-60-9
Cephaloridine 頭孢噻啶 50-59-9
Pholcodine * 509-67-1
2-CHLORO-ALPHA-[2-DIMETHYLAMINOETHYL]BENZHYDROL HYDROCHLORIDE 敵退咳 511-13-7
ALLANTOIN GALACTURONIC ACID *半乳糖醛酸 5119-24-4
細胞凍存
1.將細胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi)。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。

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