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RH-35肝癌細(xì)胞

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所在地上海市

更新時(shí)間:2016-07-28 22:38:02瀏覽次數(shù):464次

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RH-35肝癌細(xì)胞上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清,ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清,優(yōu)等胎牛血清,標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清,gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清,新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體)RH-35肝癌細(xì)胞
(1) 收集1×106個(gè)細(xì)胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測(cè)即可。
(4) 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
(1)收集2×106個(gè)細(xì)胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細(xì)胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
(5)加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞;固定待測(cè)。
(7)流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時(shí)。
(3)調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升,取1毫升細(xì)胞懸液,用PBS洗三次,細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產(chǎn)品:
(R)-3-(Boc-aMino)pyrrolidine (R)-3-叔丁氧羰基氨基吡咯烷 122536-77-0
(R)-(+)-3-METHYLSUCCINIC ACID 1-MONOMETHYL ESTER (R)-(+)-3-甲基琥珀酸單甲酯 81025-83-4
(3alpha,5beta,7alpha,12alpha)-7,12-Bis(forMyloxy)-3-hydroxycholan-24-oic acid (3ALPHA,5BETA,7ALPHA,12ALPHA)-7,12-雙(甲酰氧基)-3-羥基膽烷-24-酸 64986-86-3
(3aR,4S,5R,6aS)-(-)-5-(Benzoyloxy)-hexahydro-4(-hydroxyMethyl)-2H-cyclopenta[b]furan-2-one (3aR,4S,5R,6aS)-(-)-5-(苯甲酰氧基)-六氫-4-(羥甲基)-2H-環(huán)戊并[b]呋喃-2-酮 39746-00-4
(3aR,4S,7aR)-Octahydro-4-hydroxy-4-[2-(3-Methylphenyl)ethynyl]-1H-indole-1-carboxylic acid Methyl ester (3AR,4S,7AR)-八氫-4-羥基-4-[2-(3-甲基苯基)乙炔基]-1H-吲哚-1-羧酸甲酯 543906-09-8
(3aR,7aR)-hexahydro-2-benzofuran-1,3-dione 反式-1,2-環(huán)己二羧酸酐 71749-03-6
(3aS,7aS)-hexahydro-2-benzofuran-1,3-dione 反式-1,2-環(huán)己二羧酸酐 31982-85-1
3-BROMO-PROPYL)-DIMETHYL-AMINE (3-溴丙基)二甲基胺 53929-74-1
(3-brpMopropyl)triethylaMMoniuM broMide (3-溴丙基)*基* 3779-42-8
(3-BroMo-pyridin-2-yl)-Methyl-aMine  214977-38-5
(3-CARBOXYPROPYL)TRIMETHYLAZANIUM CHLORIDE (3-羧丙基)*基氯化銨 6249-56-5
(3-Chloro-4-Methylphenyl) MethylcyanocarboniMidodithioate  152382-24-6
(3-Methoxy-phenyl)-hydrazine 3-甲氧基苯肼 15384-39-1
(3-Nitrobenzyl)MethylaMine N-甲基-3-硝基芐胺 19499-61-7
(3R)-(-)-3-AMinopyrrolidine dihydrochloride (R)-3-氨基吡咯烷二鹽酸鹽 116183-81-4
(R)-(+)-3-(MethylaMino)pyrrolidine (3R)-(+)-3-(甲氨基)吡咯烷 139015-33-1
(R)-tert-butyl 3-forMylpyrrolidine-1-carboxylate (3R)-3-甲?;?1-吡咯烷甲酸叔丁酯 191347-94-1
(3R)-6,8a-diMethyl-3-propan-2-yl-1,2,3,4,5,8-hexahydroazulen-3a-ol  465-28-1
(3R,3aS,6aR)-hexahydrofuro[2,3-b]furan-3-ol (3R,3AS,6AR)-六氫呋喃并[2,3-B]呋喃-3-醇 156928-09-5
(3R,4R)-3-(5,6-Dihydro-4H-pyrrolo[3,2,1-ij]quinolin-1-yl)-4-(1H-indol-3-yl)-2,5-pyrrolidinedione (3R,4R)-3-(5,6-二氫-4H-吡咯并[3,2,1-IJ]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2,5-二酮 905854-02-6
細(xì)胞凍存
1.將細(xì)胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準(zhǔn)備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時(shí)后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。

SMC-1胸膜細(xì)胞瘤

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NCI-H446 H446小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

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QGY-7701肝癌細(xì)胞

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