HO-8910PM高轉(zhuǎn)移卵巢癌細胞 上海谷研科技有限公司的原代細胞株及血清,ATCC細胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清,優(yōu)等胎牛血清,標準胎牛血清,gibco特優(yōu)級胎牛血清血清,新生牛血清。
細胞術檢測樣品制備方法
直接標記抗體(FITC標記抗體)HO-8910PM高轉(zhuǎn)移卵巢癌細胞:
(1) 收集1×106個細胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標記抗體(5×105個細胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
(4) 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。[2]
未標記抗體間接免疫熒光標記法:
(1)收集2×106個細胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細胞,800rpm離心5min,洗去未結合一抗,重復一次。
(5)加入熒光標記(FITC)標記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞;固定待測。
(7)流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。
細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測樣本制成單細胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時。
(3)調(diào)整細胞濃度為106細胞/毫升,取1毫升細胞懸液,用PBS洗三次,細胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品:
(S)-(+)-HEXAHYDROMANDELIC ACID (S)-(+)-六氫扁桃酸 61475-31-8
(S)-(+)-N-BOC-3-N-FMOC-AMINOPYRROLIDINE& (S)-N-BOC-3-N-FMOC-氨基吡咯烷 307531-88-0
(S)-(+)-Pantolactone S-泛解酸內(nèi)酯 5405-40-3
(S)-(1-benzylpyrrolidin-3-yl)MethanaMine (3S)-3-氨甲基-1-芐基吡咯烷 229323-07-3
(S)-1-(TERT-BUTOXYCARBONYL)-2-AZETIDINEMETHANOL (S)-1-BOC-2-氮雜環(huán)丁烷甲醇 161511-85-9
(S)-1-(tert-butoxycarbonyl)azetidine-2-carboxylic acid 1-Boc-L-吖啶-2-羧酸 51077-14-6
(S)-1,1,1-trifluoropropan-2-aMine 125278-10-6
(S)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-Dicarboxylic Acid 1,1'-聯(lián)萘-2,2'-二甲酸 18531-96-9
(R)-1-N-Boc-piperazine-2-carboxylic acid Methyl ester (R)-1-Boc-2-哌嗪甲酸甲酯 252990-05-9
英文名稱 中文名稱 CAS號
(3R,4R)-3-ethyl-4-[(3-MethyliMidazol-4-yl)Methyl]oxolan-2-one 531-35-1
(3R,4R)-pyrrolidine-3,4-diol 186393-31-7
PAROXETINE RELATED COMPOUND C *相關物質(zhì)C 130855-30-0
(3R,4S)-3-Hydroxy-4-phenyl-2-azetidinone (3R,4S)-3-羥基-4-苯基-2-氮雜環(huán)丁酮 132127-34-5
(3S)-(+)-3-AMinopyrrolidine dihydrochloride (S)-3-氨基吡咯烷二鹽酸鹽 116183-83-6
(3S)-2,2-diMethyl-1,4-thiazinane-3-carboxylic acid 84915-43-5
(3S)-2-AZABICYCLO(2.2.1)HEPTANE-3-CARBO 171754-02-2
(S)-tert-butyl 3-forMylpyrrolidine-1-carboxylate (3S)-3-甲酰基-1-吡咯烷甲酸叔丁酯 191348-04-6
(3S)-3-Methyl-D-aspartic acid (2S,3R)-2-氨基-3-甲基丁二酸 121570-10-3
(3S,3aS,5R)-3,8-diMethyl-5-prop-1-en-2-yl-1,2,3,3a,4,5,6,7-octahydroazulene 3691-11-0
3S,4E)-3-Hydroxy-7-[(triphenylMethyl)thio]-4-heptenoic (3S,4E)-3-羥基-7-[(三苯基甲基)硫基]-4-庚烯酸 180973-24-4
細胞凍存
1.將細胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則 慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi)。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。
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