Eca-109食管癌細(xì)胞上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）Eca-109食管癌細(xì)胞：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測。
（7）流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
1-（2-Methylphenyl）piperazine 1-鄰甲基苯基哌嗪二鹽酸鹽 55974-34-0
1-（2-Methylpyridin-3-yl）ethanone 3-乙酰基-2-甲基吡啶 1721-12-6
英文名稱 中文名稱 CAS號
Reticuline 牛心果鹼 485-19-8
（S）-1,2,3,4-Tetrahydro-1-naphthylaMine （S）-2-四氫萘胺 21880-87-5
（S）-1,2,3,4-Tetrahydro-5-Methoxy-N-propyl-2-naphthalenaMine hydrochloride （S）-5-甲氧基-1,2,3,4-四氫-N-丙基-2-萘胺 （羅替戈汀） 101403-24-1
（S）-1,2,3,4-Tetrahydro-5-Methoxy-N-propyl-2-naphthalenaMine hydrochloride （S）-1,2,3,4-四氫-5-甲氧基-N-丙基-2-萘胺鹽酸鹽 93601-86-6
（S）-1,2-Epoxy-5-hexene  137688-21-2
Oxirane, 2-propyl-,（2S）-  123731-68-0
（S）-1.2-DiaMinopropane Dihydrochloride （S）-（-）-二氨基丙烷二鹽酸鹽 19777-66-3
（S）-1-BENZYL-5-OXO-PYRROLIDINE-3-CARBOXYLIC ACID METHYL ESTER （S）-1-芐基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸甲酯 428518-44-9
（S）-1-Boc-piperazine-2-carboxylic acid （S）-1-Boc-哌嗪-2-羧酸 159532-59-9
（S）-1-Boc-pyrrolidine-3-carboxylic acid Methyl ester （S）-1-Boc-3-羧基吡咯烷甲酯 313706-15-9
（S）-1-CyclopropylethylaMine （S）-1-環(huán)丙基乙胺,CHIPRO 195604-39-8
（S）-1-N-Boc-piperazine-2-carboxylic acid Methyl ester （S）-1-BOC-2-哌嗪甲酸甲酯 796096-64-5
（S）-2′-Methoxy-[1,1′]binaphthalenyl-2-ol （S）-2'-甲氧基-[1,1']聯(lián)萘-2-醇 35193-69-2
（S）-2-（2-NAPHTHYL）GLYCOLIC  144371-23-3
（S）-2-（3-（（2-Isopropylthiazol-4-yl）Methyl）-3-Methylureido）-3-Methylbutanoic acid N-[N-甲基-N-[（2-異丙基-4-噻唑基）甲基]氨基羰基]-L-* 154212-61-0
（S）-2-（AMINOETHYL）-1-N-BOC-PYRROLIDINE （S）-2-（氨乙基）-1-N-BOC-吡咯烷 239483-09-1
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。