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NCI-H460 H460大細(xì)胞肺癌細(xì)胞0

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更新時(shí)間:2016-07-13 12:15:53瀏覽次數(shù):526次

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HTB-177?NCI-H460 [H460]大細(xì)胞肺癌細(xì)胞0?ATCC株?詢價(jià)

NCI-H460 [H460]大細(xì)胞肺癌細(xì)胞0  上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清,ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清,優(yōu)等胎牛血清,標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清,gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清,新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體)NCI-H460 [H460]大細(xì)胞肺癌細(xì)胞0
(1) 收集1×106個(gè)細(xì)胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞NCI-H460 [H460]大細(xì)胞肺癌細(xì)胞0,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測(cè)即可。
(4) 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
(1)收集2×106個(gè)細(xì)胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細(xì)胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
(5)加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞;固定待測(cè)。
(7)流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時(shí)。
(3)調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升,取1毫升細(xì)胞懸液,用PBS洗三次,細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產(chǎn)品:
1-BroMobutane 溴丁烷 109-65-9
1-BroMododecane 溴代十二烷 143-15-7
15(R)-PROSTAGLANDIN F2α  37658-84-7
17-Azido-3,6,9,12,15-pentaoxaheptadecan-1-aMine 17-疊氮-3,6,9,12,15-五氧雜十七烷-1-胺 516493-93-9
17α-HydroxyyohiMban-16α-carboxylic acid ethyl ester  73840-32-1
17-β-Hydroxy-17-α-ethynyl-5-α-androstano[3,2-β]pyriMido[1,2-α]benziMidazole  144177-30-0
18-Crown-6 18-冠醚-6 17455-13-9
18-HYDROXY-11-DEOXYCORTICOSTERONE  379-68-0
19-HYDROXYCHOLESTEROL  561-63-7
19-Norandrost-4-ene-3,17-dione 19-去甲-4-雄烯二酮 734-32-7
19-Norpregna-5(10),9(11)-diene-3,20-dione, 17-hydroxy-, cyclic 3-(1,2-ethanediyl acetal) 17-羥基-19-去甲孕甾-5(10),9(11)-二烯-3,20-二酮環(huán)-3-乙二醇縮醛 42982-49-0
1alpha,25-Dihydroxycholecalciferol 鈣三醇 32222-06-3
1-acetaMido-acetone N-(2-氧代丙基)乙酰胺 7737-16-8
1-ADAMANTYL METHACRYLATE 1-金剛烷基甲基丙烯酸酯 16887-36-8
1-AMi-(hydroxyMethyl)cyclopropane hydrochloride 1-氨基環(huán)丙甲醇鹽酸鹽 115652-52-3
1-AMi-deoxy-D-Mannitol  57027-74-4
D-GLUCAMINE D-萄糖胺 488-43-7
1-AMi-Methylcyclohexane 1-氨基甲基環(huán)己烷 6526-78-9
CyclopropanaMine,1-Methyl-, hydrochloride (1:1)  88887-87-0
1-AMINO-2-NAPHTHOL-4-SULFONIC ACID 4-氨基-3-羥基-1-萘磺酸 567-13-5
1-AMino-2-phenylcyclopentanecarboxylic acid  5007-32-9
BUT-3-YN-1-AMINE 丁-3-炔-1-胺 14044-63-4
1-aMino-4,5-dihydroxy-8- (MethylaMino)anthracene-9,10-dione  56524-77-7
1-AMino-4-[[4-(ethenylsulfonyl)phenyl]aMino]-9,10-dihydro-9,10-dioxo-2-anthracenesulfonic acid  62669-67-4
1-aMinobut-3-en-2-ol  4088-60-2
1-AMinocyclopropanecarboxylic acid 1-氨基環(huán)丙烷羧酸 22059-21-8
細(xì)胞凍存
1.將細(xì)胞消化下來(lái),移入離心管離心,棄上清
2.準(zhǔn)備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時(shí)后.再放入-80度冰箱過(guò)夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過(guò)1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過(guò)夜。第二天放入液氮中。

SMC-1胸膜細(xì)胞瘤

上海谷研科技有限公司專業(yè)銷售原代細(xì)胞、傳代細(xì)胞等細(xì)胞相關(guān)產(chǎn)品,*提供專

NCI-H446 H446小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

公司專業(yè)銷售原代細(xì)胞、傳代細(xì)胞等細(xì)胞相關(guān)產(chǎn)品,*提供專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

QGY-7701肝癌細(xì)胞

QGY-7701肝癌細(xì)胞ATCC株?詢價(jià)

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