流行性乙型腦炎(EEB)病毒IgG 抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
使 用 說 明
[原理]:
本試劑盒采用親和素-化EEB純化抗原預(yù)包被板ELISA 原理,檢測人血清/血漿中存在的乙型腦炎IgG型抗體,并配以酶標(biāo)記抗人IgG(H+L鏈) 單克隆抗體作為標(biāo)記物。加入底物TMB顯色后終止反應(yīng),在450nm波長測各孔O.D值,O.D值的大小與待檢抗體含量成正比。系統(tǒng)(biotin-avidin system)的穩(wěn)固級(jí)聯(lián)放大作用,使試劑的地提高是本試劑含有的優(yōu)點(diǎn)。
[用途]:
本試劑盒用于定性檢測人血清/血漿、腦脊液中乙型腦炎病毒IgG型抗體。適用于乙型腦炎病毒既往感染的診斷和流行病調(diào)查,對(duì)既往感染和免疫狀況的診斷具有重要參考價(jià)值
適應(yīng)范圍:乙型腦炎感染的篩查診斷和監(jiān)測。乙型腦炎病毒感染之鑒別診斷和藥物療效監(jiān)測
1. 將試劑盒平衡至室溫后取出反應(yīng)板拆封。
2. 加樣:將待檢標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液作1:41(5ul—200ul)稀釋,分別加待檢標(biāo)本及陰陽性對(duì)照100ul各一孔于反應(yīng)板中,設(shè)空白對(duì)照一孔(加100ul標(biāo)本稀釋液),輕拍混勻。
3. 37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,用洗滌液洗板3次并在吸水紙上拍干。
4. 加酶結(jié)合物:每孔2滴(或100ul),混勻后置37℃溫育30分鐘。同上法洗滌3次并拍干。
5. 顯色:每孔加顯色劑A、B各一滴(或50ul),輕拍混勻(或震蕩器混勻)后置37℃10分鐘。
[結(jié)果判斷]:
1. 目測:在白色背景下觀察各孔顯色情況,蘭色者為陽性,無色者為陰性。
2. 酶標(biāo)儀測定:每孔加終止液1滴(或50ul),混勻后在450nm下測定各孔O.D值。
S/N=標(biāo)本O.D值/ 陰性對(duì)照O.D值。
S/N≥2.1為陽性;
1.5≤S/N<2.1為可疑標(biāo)本; S/N<1.5為陰性。
陰性對(duì)照(NC)小于0.10時(shí)以0.10計(jì), 大于0.1小于0.21時(shí)以實(shí)際O.D值計(jì)算;若大于0.21時(shí),實(shí)驗(yàn)可能出現(xiàn)了較大誤差,需重復(fù)實(shí)驗(yàn)。
陽性對(duì)照(PC)值通?!?.4,實(shí)驗(yàn)成立,否則需重做
1. 微孔板須密封防潮,從冷藏環(huán)境中取出時(shí),應(yīng)置室溫平衡至潮氣盡干后方可開啟使用,余者封存置2-8℃。
2. 滴加試劑前應(yīng)將液體翻轉(zhuǎn)數(shù)次混勻,滴加時(shí)保持瓶身垂直。
3. 洗滌時(shí)每孔均須加滿,防止孔內(nèi)有游離酶不能洗凈。
4. 試劑置2-8℃存放,不能凍結(jié),有效期10個(gè)月。
5. 避免用溶血、混濁或脂血標(biāo)本。
6. 新鮮標(biāo)本,如需保存,可于2-8℃冷藏48小時(shí)或-20℃凍存4周(樣本應(yīng)避光)。