腮腺炎病毒(MU)IgG 抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
使 用 說 明
[原理]:
本試劑盒采用親和素-化MU純化抗原預(yù)包被板ELISA 原理,檢測人血清/血漿中存在的MU-IgG型 抗體,并配以酶標記抗人IgG單克隆抗體作為標記物。加入底物TMB顯色后終止反應(yīng),在450nm波長測各孔O.D值,O.D值的大小與待檢抗體含量成正比。系統(tǒng)(biotin-avidin system)的穩(wěn)固級聯(lián)放大作用,使試劑的特異性、靈敏度、穩(wěn)定性極大地提高為本試劑盒之點。
[用途]:本試劑盒用于定性檢測人血清/血漿中的腮腺炎病毒IgG型抗體。適用于腮腺炎病毒既往感染的診斷和鑒別診斷有重要的參考價值。
[試劑盒組成]:
1、化MU抗原預(yù)包被板 1塊(8X12/4X12)
2、陰性對照 1瓶
3、陽性對照 1瓶
4、標本稀釋液 1瓶(20 ml/10ml,直接使用)
5、酶結(jié)合物 1瓶(12/5ml,直接使用)
6、30X濃縮洗液
1瓶(20/10ml,加蒸餾水1:30稀釋使用)
7、顯示劑A、B液 各1瓶(5/3ml)
8、終止液(2M H2SO4) 1瓶(5/3ml)
9、說明書 1份
[操作步驟]:
1. 將試劑盒平衡至室溫后取出反應(yīng)板拆封后置于板架上。
2. 樣本稀釋:用標本稀釋液以1:41(5ul—200ul)稀釋血清標本(每孔200ul標本稀釋液加5ul血清標本輕拍混勻或在震蕩器上混勻),設(shè)陰、陽性對照(各100ul)及空白對照(加100ul標本稀釋液)各一孔。輕拍混勻。
3. 37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,用洗滌液洗板3次并在吸水紙上拍干。
4. 加酶結(jié)合物:每孔2滴(或100ul),混勻后置37℃溫育30分鐘。同上法洗滌3次并拍干。
5. 顯色:每孔加顯色劑A、B各1滴(或50ul),輕拍混勻(或震蕩器混勻)后置37℃10分鐘。
[結(jié)果判斷]:
1. 目測:在白色背景下觀察各孔顯色情況,藍色者為陽性,無色者為陰性。
2. 酶標儀測定:每孔加終止液1滴(或50ul),混勻后在450nm下測定各孔O.D值。
① P/N=標本O.D值/ 陰性對照O.D值。
② P/N≥2.1為陽性;
③ 1.5≤P/N<2.1為可疑標本; P/N<1.5為陰性。
④ 陰性對照(NC)小于0.10時以0.10計, 大于0.1小于0.21時以實際O.D值計算;若大于0.21時,實驗可能出現(xiàn)了較大誤差,需重復(fù)實驗。
⑤ 陽性對照(PC)值通?!?.4,實驗成立,否則需重做。
[注意事項]:
1. 微孔板須密封防潮,從冷藏環(huán)境中取出時,應(yīng)置室溫平衡至潮氣盡干后方可開啟使用,余者封存置2-8℃。
2. 滴加試劑前應(yīng)將液體翻轉(zhuǎn)數(shù)次混勻,滴加時保持瓶身垂直。
3. 洗滌時每孔均須加滿,防止孔內(nèi)有游離酶不能洗凈。
4. 試劑置2-8℃存放,不能凍結(jié),有效期10個月。
5. 避免用溶血、混濁或脂血標本。
6. 用新鮮標本,如需保存,可于2-8℃冷藏48小時或-20℃凍存4周(樣本應(yīng)避光)。