狂犬病毒抗體檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書

以下產(chǎn)-品簡(jiǎn)介：

本試劑盒采用親和素-化Ra純化抗原預(yù)包被板ELISA 原理，檢測(cè)人血清/血漿中存在的狂犬病毒 IgG 抗體，并配以酶標(biāo)記抗人IgG單克隆抗體作為標(biāo)記物。加入底物TMB顯色后終止反應(yīng)，在450nm波長(zhǎng)測(cè)各孔O.D值，O.D值的大小與待檢抗體含量成正比。系統(tǒng)（biotin-avidin system）的穩(wěn)固級(jí)聯(lián)放大作用，使試劑的特異性、靈敏度、穩(wěn)定性極大地提高是本試劑含有的優(yōu)點(diǎn)。

本試劑盒用于定性檢測(cè)人血清/血漿中的狂犬病毒（RABIES VIRUS） IgG 抗體，對(duì)因動(dòng)物咬傷而致感染了狂犬病毒的診斷、流行病學(xué)調(diào)研和疫苗監(jiān)測(cè)有重要意義。

狂犬病毒抗體檢測(cè)試劑盒的用途： 

以及適應(yīng)范圍：

    動(dòng)物咬傷致狂犬病毒感染的診斷和監(jiān)測(cè)。

    疫苗接種后效能監(jiān)測(cè)。

流行病學(xué)調(diào)研和既往感染的診斷。

狂犬病毒抗體檢測(cè)試劑盒的注意事項(xiàng)：

1. 微孔板須密封防潮，從冷藏環(huán)境中取出時(shí)，應(yīng)置室溫平衡至潮氣盡干后方可開(kāi)啟使用，余者封存置2-8℃。

2. 滴加試劑前應(yīng)將液體翻轉(zhuǎn)數(shù)次混勻，滴加時(shí)保持瓶身垂直。

3. 洗滌時(shí)每孔均須加滿，防止孔內(nèi)有游離酶不能洗凈。

4. 試劑置2-8℃存放，不能凍結(jié)，有效期10個(gè)月。

5. 避免用溶血、混濁或脂血標(biāo)本。

   6.用新鮮標(biāo)本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小時(shí)或-20℃凍存4周（樣本應(yīng)避光）

同時(shí)狂犬病病毒為核糖核酸型蛋狀病毒，一端圓凸；一端平凹，形如，直徑65-80nm，長(zhǎng)約130～240nm。病毒易為日光、紫外線、甲醛、季胺類化合物（如新潔爾滅）、脂溶劑、50%-70%酒精等滅活，其懸液經(jīng)56℃30-60分鐘或100℃2分鐘即滅活。病毒于-70℃或凍干后置0-4℃中可保持活力數(shù)年。

被感染的組織可保存于50%甘油內(nèi)送驗(yàn)。狂犬病毒含5種蛋白，即糖蛋白（G）、核蛋白（N）、雙聚酶（L）、磷蛋白（NS）及基質(zhì)（M）等。后二者為小分子蛋白。G可導(dǎo)致體內(nèi)形成中和抗體，可對(duì)抗病毒攻擊。N導(dǎo)致的抗體但不具中和力，可用檢測(cè)漿內(nèi)包涵體。

狂犬病毒抗體檢測(cè)試劑盒的結(jié)果與判斷：

1. 目測(cè)：在白色背景下觀察各孔顯色情況，蘭色者        為陽(yáng)性，無(wú)色者為陰性。

2. 酶標(biāo)儀測(cè)定：每孔加終止液一滴，混勻后在450nm下測(cè)定各孔O.D值。

① P/N=標(biāo)本O.D值/ 陰性對(duì)照O.D值。     

② P/N≥2.1為陽(yáng)性；

③ 1.5≤P/N<2.1為可疑標(biāo)本; P/N<1.5為陰性。

④  陰性對(duì)照(NC)小于0.10時(shí)以0.10計(jì), 大于0.1小于0.21時(shí)以實(shí)際O.D值計(jì)算;若大于0.21時(shí),實(shí)驗(yàn)可能出現(xiàn)了較大誤差,需重復(fù)實(shí)驗(yàn)。

⑤  陽(yáng)性對(duì)照(PC)值通?！?.4,實(shí)驗(yàn)成立,否則需重做。

同時(shí)它也能與乙酰單件受體結(jié)合使病毒具有神經(jīng)毒性，并使體內(nèi)產(chǎn)生中和抗體及血凝抑制抗體，中和抗體具有保護(hù)作用；另一種為內(nèi)層的核蛋白抗原，可使體內(nèi)產(chǎn)生補(bǔ)體結(jié)合抗體和沉淀素，無(wú)保護(hù)作用。

　患者和患病動(dòng)物體內(nèi)所分離到的病毒，稱為自然病毒或街毒（streevirus），其特點(diǎn)是毒力強(qiáng)，但經(jīng)多次通過(guò)兔腦后成為固定毒（fixedvirus），毒力降低，可以制做疫苗?？袢?/span>毒不耐熱，在56℃時(shí)15~30分鐘或100℃時(shí)2分鐘即可滅活；對(duì)酸、堿、新潔爾滅、福爾馬林等消物敏感；日光、紫外線、超聲波、70%酒精、0.01%碘液和1%-2%的肥皂水等亦能使病毒滅活，但在冷凍或凍干狀態(tài)下可長(zhǎng)期保存

    狂犬病毒抗體檢測(cè)試劑盒的操作步驟：

1. 將試劑盒平衡至室溫后取出反應(yīng)板拆封。

2. 加樣：將待檢標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液作1：101　　　?。?/span>2ul—200ul）稀釋，分別加待檢標(biāo)本及陰陽(yáng)性對(duì)照100ul各一孔于反應(yīng)板中，設(shè)空白對(duì)照一孔（加100ul標(biāo)本稀釋液），輕拍混勻。

3. 37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液洗板3次并在吸水紙上拍干。

4. 加酶結(jié)合物：每孔2滴，混勻后置37℃溫育30分鐘。同上法洗滌3次并拍干。

5. 顯色：每孔加顯色劑A、B各一滴，輕拍混勻（或震蕩器混勻）后置37℃10分鐘。

狂躁性狂犬病患者的癥狀是機(jī)能亢進(jìn)，躁動(dòng)，恐水，有時(shí)還怕風(fēng)。數(shù)日后患者因心肺衰竭而死亡。

麻痹性狂犬病約占人類死亡病例總數(shù)的20%。與狂躁性狂犬病相比，其病程不那么劇烈，且通常較長(zhǎng)。從咬傷或抓傷部位開(kāi)始，肌肉逐漸麻痹，然后患者漸漸陷入昏迷，最后死亡。麻痹性狂犬病往往會(huì)有誤診，造成狂犬病的漏報(bào)現(xiàn)