流式細(xì)胞術(shù)（Flow Cytometry，F(xiàn)CM）是一種對(duì)液流中排成單列的細(xì)胞或其它生物微粒（如微球，細(xì)菌，小型模式生物等）逐個(gè)進(jìn)行快速定量分析和分選的技術(shù)。作為應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行檢測的技術(shù)平臺(tái)，現(xiàn)代流式細(xì)胞儀產(chǎn)生于上世紀(jì)六七十年代。經(jīng)過近四十年的發(fā)展和完善，今天的流式細(xì)胞儀已經(jīng)十分成熟，并被廣泛的運(yùn)用于從基礎(chǔ)研究到臨床實(shí)踐的各個(gè)方面，涵蓋了細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、血液學(xué)、腫瘤學(xué)、藥理學(xué)、遺傳學(xué)及臨床檢驗(yàn)等領(lǐng)域，在各學(xué)科中發(fā)揮著重要的作用。

一、細(xì)胞生物學(xué)研究

流式細(xì)胞術(shù)可用于測定細(xì)胞周期各時(shí)相細(xì)胞的百分比。通過測定細(xì)胞群體中每個(gè)細(xì)胞的DNA含量，得出DNA含量分布曲線。例如，在測定Hela細(xì)胞DNA含量分布曲線上，第一個(gè)峰是含有2CDNA含量的G1/G0（DNA合成前期/靜止期）細(xì)胞,其次一個(gè)峰是4CDNA含量的G2+M(DNA合成后期＋有絲分裂期)細(xì)胞，從2C～4C間的區(qū)域?yàn)镾期（DNA合成期）細(xì)胞。采用繪圖法或計(jì)算機(jī)擬合法可計(jì)算出細(xì)胞周期各時(shí)相細(xì)胞占整個(gè)細(xì)胞群體的百分?jǐn)?shù)。

用流式細(xì)胞術(shù)可進(jìn)行多參數(shù)分析，即同時(shí)測定一個(gè)細(xì)胞的多種性質(zhì)。如散射光和熒光，或多種不同顏色的熒光。例如細(xì)胞經(jīng)吖啶橙染色后，DNA發(fā)綠色熒光，RNA發(fā)紅色熒光。測定這兩種熒光就能同時(shí)得知一個(gè)細(xì)胞內(nèi)的DNA和RNA含量。測定結(jié)果可用二維散點(diǎn)圖或三維立體圖表示。用這種方法可根據(jù)DNA和RNA含量而鑒別出G0與G1、M期和 G2期細(xì)胞。用流式細(xì)胞術(shù)與液體閃爍技術(shù)相配合,還可求得細(xì)胞通過G1、S和G2+M期的時(shí)間(T、Ts、T+M及其變異系數(shù)。近年利用抗溴脫氧尿苷(Brdurd)單克隆抗體能發(fā)現(xiàn)滲入到細(xì)胞 DNA內(nèi)的溴脫氧尿苷。將此種熒光抗體技術(shù)與測定細(xì)胞 DNA含量相結(jié)合，是研究DNA合成和細(xì)胞周期的一種非常有用的技術(shù)。此外,流式細(xì)胞術(shù)還可測定細(xì)胞群體同步化的程度和所處的時(shí)期，鑒別死細(xì)胞和活細(xì)胞，利用熒光標(biāo)記配體，還可定量測定細(xì)胞表面和內(nèi)部的受體等。

二、遺傳學(xué)研究

用流式細(xì)胞術(shù)測定染色體DNA含量,可得到染色體頻率分布圖（圖2），稱為流式染色體核型分析。同類型染色體出現(xiàn)一個(gè)峰，峰的面積代表這種類型染色體的豐度。流式染色體核型分析技術(shù)不僅能快速分析核型，而且能分選出不同類型的染色體,做成人類每條染色體的DNA文庫，可用于人類基因組研究、遺傳病和癌癥的診斷的研究。

三、免疫學(xué)研究

結(jié)合免疫熒光方法，流式細(xì)胞術(shù)可辨認(rèn)和計(jì)數(shù)帶有不同表面特異性抗原的細(xì)胞，例如用熒光素標(biāo)記的免疫球蛋白鑒別T和B淋巴細(xì)胞（圖3），根據(jù)細(xì)胞表面抗原的不同,進(jìn)一步分辨出不同的T和B淋巴細(xì)胞亞群，以及測定每個(gè)細(xì)胞所帶抗原的數(shù)量、密度及其動(dòng)力學(xué)參數(shù)等。也可用流式細(xì)胞分選技術(shù)將帶有“＋"和不帶有“－"的某種特異抗原的細(xì)胞群體分類收集，供研究其功能特性。

流式細(xì)胞術(shù)對(duì)于判斷免疫缺陷癥，如愛滋?。ǐ@得性免疫缺損綜合征）的重要特征，即T4和T8淋巴細(xì)胞比例改變（T4細(xì)胞大量減少）以及判斷自身免疫病和確定白血病、淋巴癌的表型等，都是非常有用的。此外，流式細(xì)胞術(shù)還可用于定量分析結(jié)合于細(xì)胞上的熒光素標(biāo)記的外源凝集素，測定細(xì)胞表面積和熒光素結(jié)合位點(diǎn)的相對(duì)密度，結(jié)合細(xì)胞動(dòng)力學(xué)測定每個(gè)細(xì)胞結(jié)合位點(diǎn)的數(shù)目，以及研究各種外源凝集素與細(xì)胞表面結(jié)合的競爭性等。

四、腫瘤學(xué)研究

腫瘤細(xì)胞一般都含有異常數(shù)量的 DNA。在大多數(shù)實(shí)體瘤和急性白血病中都發(fā)現(xiàn)有非整倍體的細(xì)胞，由于流式細(xì)胞術(shù)樣品制備方法簡單，測定結(jié)果精確，能快速得到有關(guān)DNA倍性的信息,因而能提供有價(jià)值的診斷數(shù)據(jù)。如果在測量 DNA含量的同時(shí)，再測定其他參數(shù)（如不同類型的中等纖維蛋白，蛋白質(zhì)含量、細(xì)胞大小、核質(zhì)比等）則可進(jìn)一步提高診斷的可靠性。

流式細(xì)胞術(shù)可在實(shí)驗(yàn)和臨床中評(píng)價(jià)腫瘤和放療的作用，現(xiàn)在根據(jù)流式細(xì)胞術(shù)和細(xì)胞動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)來監(jiān)視腫瘤治療的工作已經(jīng)在實(shí)際工作中開展起來。此外，流式細(xì)胞術(shù)在血液學(xué)、微生物學(xué)、分子生物學(xué)等領(lǐng)域中也得到廣泛的應(yīng)用。流式細(xì)胞術(shù)正在向高靈敏、高速度、多參數(shù)測量、獲取形態(tài)學(xué)信息等方面發(fā)展。