細(xì)胞:TM3細(xì)胞
中文名稱:小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:D/F12+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
TM3細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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人體胚胎干細(xì)胞增殖培養(yǎng)基
一項(xiàng)用于人體胚胎干細(xì)胞(hESCs)增殖的符合條件無(wú)血清培養(yǎng)系統(tǒng)已被開發(fā)。這個(gè)新的培養(yǎng)系統(tǒng)僅依靠限定的成分,便于安全的、規(guī)模性的擴(kuò)增細(xì)胞以用于細(xì)胞治療。
H9c2細(xì)胞: 貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90% DMEM高糖、10% FBS
研究證實(shí)hESCs能在僅含有人源蛋白和限定的重組生長(zhǎng)因子的培養(yǎng)基中擴(kuò)增。在這些限定條件下,hESCs能在培養(yǎng)中至少增殖120天,同時(shí)保持正常形態(tài)、倍增時(shí)間和標(biāo)記特性的表達(dá)。
GLC-82細(xì)胞: 貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90% DMEM高糖、10% FBS
此外,hESCs能在這樣條件下增殖并繼續(xù)多能分化為內(nèi)胚層、中胚層和外胚層等三種人體細(xì)胞。
這項(xiàng)工作是在以前無(wú)滋養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)條件用于hESCs培養(yǎng)的工作基礎(chǔ)上發(fā)展的。早期開發(fā)的方法是使用細(xì)胞外基質(zhì)蛋白和無(wú)細(xì)胞培養(yǎng)而沒(méi)有與滋養(yǎng)細(xì)胞直接接觸。
GL261-Luc細(xì)胞: 貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90% 高糖DMEM、10% FBS
這個(gè)進(jìn)展極大方便于細(xì)胞規(guī)模性生產(chǎn),同時(shí)從根本上排除了在對(duì)未分化細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,非人源感染因子污染的風(fēng)險(xiǎn)。
這是一個(gè)邁向我們生產(chǎn)安全的、經(jīng)濟(jì)有效細(xì)胞用于細(xì)胞療法為基礎(chǔ)治療退行性病變目標(biāo)的重要進(jìn)展。除了達(dá)到了我們的安全性目標(biāo)外,僅配制過(guò)程的突破已經(jīng)明顯降低了目前工業(yè)化制造的成本。
GL261細(xì)胞: 貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件: 90% DMEM高糖、10% FBS
正在進(jìn)行有關(guān)這個(gè)培養(yǎng)系統(tǒng)工業(yè)化實(shí)施草案以使這種治療性細(xì)胞能夠生產(chǎn)。