細(xì)胞:TE-1細(xì)胞
中文名稱:人食管癌細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
TE-1細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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這種抗體靶向病毒的外膜區(qū)域,該區(qū)域也能夠與廣譜中和抗體結(jié)合。在這樣做時(shí),輔助譜系抗體選擇具有較強(qiáng)能力的病毒刺激廣譜中和抗體系。因此,一組抗體選擇一組病毒逃逸突變體“教導(dǎo)”廣譜中和抗體系如何中和HIV變種。這個(gè)過程會(huì)反復(fù)發(fā)生在整個(gè)感染中,導(dǎo)致中和多種HIV毒株的抗體譜的產(chǎn)生。
HA細(xì)胞: 貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% 高糖DMEM、10% FBS
一個(gè)bnAb譜系的成熟可以通過輔助譜系來提升的這一發(fā)現(xiàn),對艾滋病疫苗的發(fā)展有著重要的影響,來自于初始傳播/原始病毒的免疫原的反復(fù)免疫,以及逃避變體與bnAb譜系具有更高的結(jié)合能力,都可能需要激活bnAbs。
NCI-H526細(xì)胞: 懸浮細(xì)胞 通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% RPMI-1640、10% FBS
下一步是要在能夠產(chǎn)生廣譜中和抗體的其他個(gè)體中進(jìn)行類似的研究,并確定誘導(dǎo)這種抗體的其他特異性是一個(gè)普遍的機(jī)制,證明這一發(fā)現(xiàn)可用于設(shè)計(jì)可誘導(dǎo)廣譜中和抗體的免疫原。
H22細(xì)胞: 懸浮細(xì)胞 通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% RPMI-1640、10% FBS
利用這項(xiàng)研究的結(jié)果,該研究模仿自然感染艾滋病毒的光譜中和抗體發(fā)展,已經(jīng)設(shè)計(jì)出一種疫苗免疫原,有選擇性地觸發(fā)產(chǎn)生抗體的B細(xì)胞進(jìn)行合作,產(chǎn)生廣譜中和抗體。