細(xì)胞：TM4細(xì)胞
中文名稱：小鼠睪丸細(xì)胞
生長特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：D/F12+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
TM4細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；)
DNA合成方法取得突破
核糖核酸(RNA)不僅是遺傳信息的載體，還是活細(xì)胞中生命功能的執(zhí)行者，是一類重要的檢測靶標(biāo)，在分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)診斷和疾病治療中受到廣泛的關(guān)注。
DT40細(xì)胞： 懸浮細(xì)胞 通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件：90% RIMP1640、10% FBS
一般來說，檢測RNA的方法都需要首先被反轉(zhuǎn)錄酶進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄形成互補(bǔ)DNA(cDNA)，然后在DNA聚合酶的作用下進(jìn)行擴(kuò)增檢測。DRG細(xì)胞： 貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件：90% 高糖DMEM、10% FBS
研究者發(fā)現(xiàn)，幾種DNA聚合酶具有內(nèi)在的反轉(zhuǎn)錄酶活性，即以RNA為模板反轉(zhuǎn)錄為cDNA的能力，并且這種cDNA能直接作為模板進(jìn)行后續(xù)的擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)。GIST882細(xì)胞： 貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件：90% 高糖DMEM、10% FBS
此項(xiàng)研究的發(fā)現(xiàn)，突破了DNA聚合酶只能以DNA為模板合成DNA的傳統(tǒng)觀念，為實(shí)現(xiàn)RNA的單酶和一步法檢測提供了酶學(xué)基礎(chǔ)。GIST430細(xì)胞： 貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件：90% 高糖DMEM、10% FBS
這種一步法檢測可以大大縮短反應(yīng)時(shí)間，降低實(shí)驗(yàn)費(fèi)用，對核酸的即時(shí)檢測，如血液核酸篩查、檢驗(yàn)檢疫(如艾滋病(AIDS)病毒、埃博拉病毒)等領(lǐng)域具有重要意義。
