細(xì)胞:IMR-90細(xì)胞
中文名稱:人胚肺成纖維細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
IMR-90細(xì)胞培養(yǎng)基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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成體骨髓給sheng殖系干細(xì)胞群提供了原始細(xì)胞。有間接證據(jù)表明,造血干細(xì)胞和原始sheng殖細(xì)胞可能共享一個(gè)共同的細(xì)胞祖先。
基于這點(diǎn),假設(shè)骨髓既然可以成為成體造血干細(xì)胞的“巢穴”,那么也就很有可能成為成體sheng殖系干細(xì)胞的細(xì)胞庫。
c666-1細(xì)胞:貼壁細(xì)胞\通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% RPMI 1640、10% FBS
他們發(fā)現(xiàn)從成體小鼠分離得到的骨髓細(xì)胞表達(dá)很多shengzhi系信號(hào)蛋白。仔細(xì)檢查其中的一個(gè)信號(hào)蛋白,發(fā)現(xiàn)標(biāo)記的信號(hào)分子隨著faqing周期發(fā)生了變化。
將骨髓細(xì)胞轉(zhuǎn)移到卵母細(xì)胞移除的小鼠中,研究者發(fā)現(xiàn)在受體小鼠的卵巢中快速生成包含卵母細(xì)胞的濾泡,而且具備了維持這種濾泡細(xì)胞生成的能力。
C8161細(xì)胞:貼壁細(xì)胞\通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% RPMI-1640、10% FBS
明顯地,當(dāng)外周血細(xì)胞移植進(jìn)入化學(xué)處理小鼠之后,立即促使供體細(xì)胞來源的卵母細(xì)胞生成,暗示了sheng殖系干細(xì)胞可能來源于骨髓,通過血液進(jìn)入卵巢,轉(zhuǎn)變之后形成的。