細(xì)胞：K7M2 wt細(xì)胞
中文名稱(chēng)：小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
K7M2 wt細(xì)胞培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀(guān)察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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TIGAR，細(xì)胞凋亡和糖酵解的一種p53誘導(dǎo)調(diào)節(jié)因子；p53腫瘤抑制蛋白能夠通過(guò)多種機(jī)制阻止癌癥的發(fā)展，包括使細(xì)胞周期停滯、細(xì)胞凋亡和維持基因組的穩(wěn)定性等。
BxPC-3細(xì)胞：貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件：90% RPMI-1640、10% FBS
研究人員確定出一種叫做TIGAR(TP53誘導(dǎo)糖酵解和凋亡調(diào)節(jié)因子)的p53誘導(dǎo)基因。TIGAR的表達(dá)降低了在細(xì)胞中果糖-2,6-磷酸鹽(fructose-2,6-bisphosphate)的水平，從而抑制糖酵解并使細(xì)胞內(nèi)活性氧總體水平下降。
C2C12細(xì)胞：貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件：90% DMEM高糖、10% FBS
TIGAR的功能與它保護(hù)細(xì)胞不發(fā)生與活性氧有關(guān)的凋亡的能力相對(duì)應(yīng)。因此，降低TIGAR表達(dá)的水平會(huì)使細(xì)胞發(fā)生p53誘導(dǎo)的死亡；TIGAR的表達(dá)因此可以調(diào)整對(duì)p53的凋亡應(yīng)答，從而使細(xì)胞在面對(duì)溫和或可逆轉(zhuǎn)、修復(fù)的瞬間壓力信號(hào)時(shí)能夠存活下來(lái)。
C4-2細(xì)胞：貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件：90% 高糖DMEM、10% FBS
因TIGAR導(dǎo)致的細(xì)胞內(nèi)活性氧水平的降低還可能在p53保護(hù)基因組損傷的累積功能扮演一定的角色。p53誘導(dǎo)的自我吞噬調(diào)節(jié)因子——DRAM，細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵 CellP53細(xì)胞凋亡機(jī)制重要新發(fā)現(xiàn)
C6細(xì)胞：貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件：F-12K、2.5% FBS+15% horse serum
細(xì)胞死亡的失活失腫瘤發(fā)育的一個(gè)重要步驟，而聲名顯赫的腫瘤抑制因子p53則失細(xì)胞凋亡的一個(gè)關(guān)鍵仲裁者。隨人p53在細(xì)胞凋亡中的一個(gè)功能已經(jīng)被確定出來(lái)，但是它與其他的控制細(xì)胞凋亡的途徑之間還不清楚。
C-33A細(xì)胞：貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件：90% MEM、10% FBS
p53的靶標(biāo)基因DRAM，這個(gè)基因編碼一種誘導(dǎo)細(xì)胞死亡吞噬(p53介導(dǎo)的一種細(xì)胞死亡機(jī)制)的溶酶體蛋白。研究人員證實(shí)p53通過(guò)一種依賴(lài)DRAM的放射誘導(dǎo)細(xì)胞自我吞噬，并且當(dāng)只有DRAM發(fā)生過(guò)表達(dá)時(shí)會(huì)導(dǎo)致最小限度的細(xì)胞凋亡。也就說(shuō)DRAM是p53介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵因子。
C8-D1A細(xì)胞：貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件：90% 高糖DMEM、10% FBS
而且，對(duì)腫瘤中DRAM的分析結(jié)果顯示，DRAM表達(dá)的減少常伴隨著野生型p53的保留。這些研究不但發(fā)現(xiàn)自我吞噬的一種壓力誘導(dǎo)調(diào)節(jié)因子，而且還突出了DRAM和自我吞噬到p53功能和損傷誘導(dǎo)的程序性細(xì)胞凋亡之間的關(guān)系。
