細(xì)胞:HUVEC細(xì)胞
中文名稱:人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
HUVEC細(xì)胞培養(yǎng)基:ECM +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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當(dāng)細(xì)胞分裂時(shí),其控制機(jī)理將確保遺傳物質(zhì),即染色體正確地分配到后代細(xì)胞中。研究人員目前已經(jīng)破解控制染色體分配的分子原理。
檢測點(diǎn)激酶在染色體分配過程中擔(dān)負(fù)著控制角色。檢測點(diǎn)激酶并不是如以前所假定的僅與染色體存在直接關(guān)聯(lián)。相反,他們與細(xì)胞分裂紡錘體有關(guān)的不同種類蛋白質(zhì)存在相互影響。
BxPC-3細(xì)胞:貼壁細(xì)胞\通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% RPMI-1640、10% FBS
C2C12細(xì)胞:貼壁細(xì)胞\通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% DMEM高糖、10% FBS
該研究成果非常重要,因?yàn)椴徽_的染色體分配可能會(huì)導(dǎo)致畸形和像癌癥一樣的疾病發(fā)生。對染色體分配過程的新了解將更好地促進(jìn)我們對癌癥產(chǎn)生分子原理的了解。
微管桿形絲擔(dān)負(fù)劃分細(xì)胞中染色體的角色。他們將染色體、著絲粒和中心體的起點(diǎn)連接起來。細(xì)胞中心體負(fù)責(zé)利用γ-微管蛋白環(huán)式復(fù)合體來組織微管絲的紡錘形結(jié)構(gòu)。
C4-2細(xì)胞:貼壁細(xì)胞\通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% 高糖DMEM、10% FBS
C6細(xì)胞:貼壁細(xì)胞\通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:F-12K、2.5% FBS+15% horse serum
直到現(xiàn)在我們一直認(rèn)為染色體正確分配控制只受著絲粒中檢測點(diǎn)激酶的監(jiān)控。當(dāng)微管正確附著到著絲粒上后,檢測點(diǎn)激酶便通知細(xì)胞可以進(jìn)行正確的染色體分配了。