細(xì)胞:HUMSC細(xì)胞
中文名稱:人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
HUMSC細(xì)胞培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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研究人員對(duì)在遺傳性血液疾病如鐮刀細(xì)胞貧血和beta-thalassemia等疾病中起到一定作用的血紅素基因和突變進(jìn)行了深入的研究。
在研究中利用小鼠模型證明蛋白質(zhì)KLF2對(duì)新紅血球的形成至關(guān)重要。這些發(fā)現(xiàn)將會(huì)指引研究人員發(fā)展出治療鐮刀細(xì)胞貧血和beta-thalassemia的基因療法。
Calu-3細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90%MEM-EBSS: Minimum Essential Medium、10% FBS
Capan-1細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% DMEM高糖、10% FBS
在人類中,有四個(gè)球蛋白基因聚集在11號(hào)染色體上。這些基因包括epsilon-globin基因、兩個(gè)gamma-globin基因和beta-globin基因。
在胚胎發(fā)育時(shí),胚胎的epsilon-globin基因首先被活化,然后是gama-globin基因。在形成成熟形式后beta-globin接管任務(wù)。
CaSki細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% RPMI-1640、10% FBS
CCC-HSF-1細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% 高糖DMEM、10% FBS
研究人員證明KLF2蛋白能夠調(diào)節(jié)胚胎球蛋白基因的生產(chǎn)和小鼠模型中胚胎紅細(xì)胞的成熟和穩(wěn)定。他們發(fā)現(xiàn)KLF2蛋白負(fù)責(zé)控制和開啟這種胚胎球蛋白基因。
在基因療法中,一種正常的DNA被插入細(xì)胞并校正其遺傳缺陷。這些新發(fā)現(xiàn)則對(duì)血液疾病的治療具有重要意義,人們有可能利用基因療法和其他新穎的策略來治療這些疾病。