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當(dāng)前位置:上海酶聯(lián)生物研究所>>技術(shù)文章>>試劑盒的顯示和比色
elisa試劑盒TMB經(jīng)HRP作用后,約40分鐘顯色達(dá),隨即逐漸削弱,至2小時后即可*衰退至無色。
TMB 的中止液有多種,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應(yīng)中止。這類中止劑尚能使藍(lán)色堅持較長時間(12-24 小時)不褪,是目視判別的出色中止劑。
此外,elisa試劑盒各類酸性中止液則會使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色,此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。酶標(biāo)比色儀簡稱酶標(biāo)儀,通常指于測讀ELISA 效果吸光度的光度計。酶標(biāo)儀的主要性能指標(biāo)有:測讀速度、讀數(shù)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、準(zhǔn)確度和可測范圍、線性等等。
優(yōu)異的酶標(biāo)儀的讀數(shù)一般可準(zhǔn)確到0.001,準(zhǔn)確性為±1%,重復(fù)性達(dá)0.5%。酶標(biāo)儀不應(yīng)安頓在陽光或強光照射下,操作時室溫宜在15 -30℃ ,運用前先預(yù)熱儀器 15-30 分鐘,測讀效果更安穩(wěn)。
測讀A值時,要選用產(chǎn)品的活絡(luò)吸收峰,如OPD用492nm 波長。elisa試劑盒有的酶標(biāo)儀可用雙波長式測讀,即每孔先后測讀兩次,*次在zui適波長(W1),第2次在不活絡(luò)波長(W2),兩次測定間不 移動ELISA 板的方位,畢竟測得的A 值為兩者之差(W1-W2)。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等構(gòu)成的光煩擾。
肉眼判別效果時,顯色淺不易調(diào)查,影響效果的準(zhǔn)確性,有必要運用酶標(biāo)儀檢測,以保效果一致性。
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