B16黑色素瘤細(xì)胞上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）B16黑色素瘤細(xì)胞：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測(cè)即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測(cè)。
（7）流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
（S）-1-Phenylethanethiol （S）-1-甲基芐硫酚 33877-11-1
（S）-（?）-4-Oxo-2-azetidinecarboxylic acid （S）-（-）-4-氧代-2-氮雜環(huán)丁烷甲酸 16404-94-7
（+/-）-2-ISOPROPENYL-5-METHYL-4-HEXEN-1-YL ACETATE 乙酸熏衣草酯 50373-59-6
ADOGEN（R） 464 甲基三烷基氯化銨 63393-96-4
Aminoethyl nitrate 氨乙硝酸 646-02-6
N-octylpyridin-4-amine  64690-19-3
Trimethoprim * 738-70-5
Methyl Mercaptane 甲硫醇,壓力包裝,約為22克。 74-93-1
Bornyl isovalerate 異戊酸龍腦酯 76-50-6
5-CHLORO-1H-1,2,4-TRIAZOLE-3-CARBOXYLIC ACID ETHYL ESTER 5-氯-1H-1,2,4-三唑-3-甲酸乙酯 774608-88-7
5-BROMO-1H-1,2,4-TRIAZOLE-3-CARBOXYLIC ACID ETHYL ESTER 5-溴-1H-1,2,4-三唑-3-甲酸乙酯 774608-89-8
aluMinuM hydride, alane, AlH3 氫化鋁 7784-21-6
Diclofenac diethylaMine * 78213-16-8
2-AMINO-4-NITROBENZENEMETHANOL （2 -氨基- 4 -硝基苯基）甲醇 78468-34-5
OrMeloxifene 奧美昔芬 78994-24-8
paraffin 石蠟 8002-74-2
FEMA 2262 河貍香油 8023-83-4
METHYL （S）-（+）-3-HYDROXY-2-METHYLPROPIONATE 3-羥基-2-甲基-丙酸甲酯 80657-57-4
2-chloro-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyridine 2-氯-6,7-二氫-5H-吡咯并[3,4-B]吡啶 810668-57-6
THIOLACTOMYCIN  82079-32-1
SodiuM p-tolylsulfinate 對(duì)甲苯亞磺酸鈉 824-79-3
（2S）-5-BROMO-3-（2-PYRROLIDINYL）PYRIDINE  83023-58-9
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來(lái)，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過(guò)夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過(guò)1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過(guò)夜。第二天放入液氮中。