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MGC80-3胃癌細(xì)胞

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所在地上海市

更新時(shí)間:2016-07-12 19:50:01瀏覽次數(shù):614次

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MGC80-3胃癌細(xì)胞 上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清,ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清,優(yōu)等胎牛血清,標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清,gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清,新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體)MGC80-3胃癌細(xì)胞
(1) 收集1×106個(gè)細(xì)胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測(cè)即可。
(4) 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
(1)收集2×106個(gè)細(xì)胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細(xì)胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
(5)加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞;固定待測(cè)。
(7)流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時(shí)。
(3)調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升,取1毫升細(xì)胞懸液,用PBS洗三次,細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產(chǎn)品:
1-AMinonapthelene 3,6,8 trisulfonic acid disodiuM 8-氨基萘-1,3,6-三磺酸 117-42-0
1,3,5-Benzenetricarboxaldehyde 均苯*醛 3163-76-6
1g  38588-64-6
1,3,5-Benzenetrisulfonic acid trisodiuM salt  43052-65-9
SURAMIN  145-63-1
1,3,5-TriaMinobenzene trihydrochloride 1,3,5-三氨基苯 108-72-5
1,3,5-TriaMinobenzene trihydrochloride 1,3,5-三氨基苯鹽酸鹽 638-09-5
1,3,5-Triazatricyclo[3.3.1.13,7]decan-2-aMine(9CI)  115519-84-1
tetrahydro-1,3,5-triazin-2(1H)-one  7098-14-8
1,3,5-Triazine 1,3,5-三嗪 290-87-9
1,3,5-TRIAZINE-2,4,6-TRIAMINE, POLYMER WITH FORMALDEHYDE, METHYLATED 1,3,5-三嗪-2,4,6-三胺與甲醛和甲縮醛的聚合物 68002-20-0
1,3,5-triazine-2,4,6-triyltrinitrilohexaMethanol  531-18-0
Teroxirone 1,3,5-三縮水ganyou-S-三嗪三酮 2451-62-9
1,3,5-Tri-O-acetyl-2-deoxy-D-erythro-pentofuranose 1,3,5-三乙?;?2-脫氧-D-赤式戊呋喃糖 4594-52-9
1,3,5-Tris(3-broMophenyl)benzene 1,3,5-三(3-溴苯基)苯 96761-85-2
1,3,6,8-Pyrenetetrasulfonic acid tetrasodiuM salt 1,3,6,8-芘四碳酸四鈉鹽 59572-10-0
1,3,6,8-Pyrenetetrasulphonic acid  6528-53-6
1,3,6-HEXANETRICARBONITRILE 1,3,6-己烷三腈 1772-25-4
1,3,6-Octatriene,3,7-diMethyl-, (3Z)- ferric aMMoniuM oxalate 羅勒烯 異構(gòu)體混合物 3338-55-4
POLY(M-XYLYLENEDIAMINE-ALT-EPICHLOROHYDRIN), DIAMINE TERMINATED  135470-04-1
4-(4,6-Diphenyl-1,3,5-triazin-2-yl)benzene-1,3-diol  38369-95-8
1,3-Benzenediol,4-pentadecyl-  16825-54-0
1,3-Benzodioxol-4-aMine,6-Methoxy-(9CI) 6-甲氧基-4-氨基-1,3-苯并二氧戊環(huán) 401811-81-2
1,3-Benzodioxole-5-ethanaMine 3,4-亞甲二氧* 1484-85-1
細(xì)胞凍存
1.將細(xì)胞消化下來(lái),移入離心管離心,棄上清
2.準(zhǔn)備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時(shí)后.再放入-80度冰箱過(guò)夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過(guò)1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過(guò)夜。第二天放入液氮中。

SMC-1胸膜細(xì)胞瘤

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NCI-H446 H446小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

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QGY-7701肝癌細(xì)胞

QGY-7701肝癌細(xì)胞ATCC株?詢價(jià)

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