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QG-56肺扁平上皮癌細胞

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所在地上海市

更新時間:2016-07-16 06:09:06瀏覽次數(shù):436次

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QG-56肺扁平上皮癌細胞 上海谷研科技有限公司的原代細胞株及血清,ATCC細胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清,優(yōu)等胎牛血清,標準胎牛血清,gibco特優(yōu)級胎牛血清血清,新生牛血清。
細胞術檢測樣品制備方法
直接標記抗體(FITC標記抗體)QG-56肺扁平上皮癌細胞
(1) 收集1×106個細胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標記抗體(5×105個細胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
(4) 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。[2]
未標記抗體間接免疫熒光標記法:
(1)收集2×106個細胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細胞,800rpm離心5min,洗去未結合一抗,重復一次。
(5)加入熒光標記(FITC)標記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞;固定待測。
(7)流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。
細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測樣本制成單細胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時。
(3)調(diào)整細胞濃度為106細胞/毫升,取1毫升細胞懸液,用PBS洗三次,細胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產(chǎn)品:
1-azidohexane  6926-45-0
1-Benzhydrylazetidin-3-one 1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷-3-酮 40320-60-3
1-BENZYL-3-METHYL-4-PIPERIDONE 1-芐基-3-甲基-4-哌啶酮 34737-89-8
1,4-dihydro-5H-tetrazol-5-one  16421-52-6
1,5-diMethyl-1H-indole-2-carbaldehyde  883526-76-9
1,5-Diphenyl-3-pentanone  5396-91-8
1,5-HEXADIENE-3-OL 1,5-己二烯-3-醇 924-41-4
1,5-Naphthalene Diisocyanate 萘二異氰酸酯 3173-72-6
1,5-naphthalenedisulfonate 美海屈林萘二磺酸鹽 6153-33-9
1,5-Pentanediboronic acid pinacol ester 1,5-戊烷二硼酸二(頻哪酯) 1073371-70-6
1,6-Bis(triMethoxysilyl)hexane 1,6-雙*氧基硅基己烷 87135-01-1
5,6-DiMethylheptane-1,6-diaMine *基六亞甲基二肟 25620-58-0
1,6-DibroMonaphthalene 1,6-二溴萘 19125-84-9
1,6-HEXANEDIAMINE 1,6-已烷二胺 124-09-4
1,6-Hexanediylbis[MethylcarbaMic chloride 1,6-己烷二基雙[甲基氨基甲酰氯] 99191-71-6
1,7-Dichloroheptan-4-one 1,7-二氯-4-庚酮 40624-07-5
1,7-Dinitronaphthalene  24824-25-7
1,8-DIAMINO-P-MENTHANE 4-氨基-α,α-4-*基-環(huán)己烷甲胺 80-52-4
1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ene 1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯 6674-22-2
1,8-dihydroxy-3-Methylbenzo[a]anthracene-7,12-dione  7414-92-8
細胞凍存
1.將細胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi)。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。

SMC-1胸膜細胞瘤

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QGY-7701肝癌細胞

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