CW-2結(jié)腸腺癌細(xì)胞上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）CW-2結(jié)腸腺癌細(xì)胞：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測。
（7）流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
2,5,8,11,14,17,20,23-octaoxatetracosane  1191-91-9
2,5-diaMinobenzoic acid 2,5-二氨基苯甲酸 610-74-2
2,5-DiaMinophenol  636-25-9
2,5-DIAZABICYCLO[2.2.1]HEPTANE, 2-METHYL- 2-甲基-2,5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚烷 59436-77-0
2,5-DibroMonitrobenzene 2,5-二溴硝基苯 3460-18-2
2,5-Dichloropyrazine 2,5-二氯吡嗪 19745-07-4
5-10g 2,5-二氟-4-甲基苯甲酸 103877-80-1
2,5-DiMethoxy-4-（ethylthio）phenethylaMine 2,5-二甲氧基-4-乙硫基* 207740-24-7
2,5-DiMethoxy-4-chlorophenylethylaMine 2,5-二甲氧基-4-氯* 88441-14-9
4-IODO-2,5-DIMETHOXYPHENETHYLAMINE 2,5-二甲氧基-4-碘*（2C-I） 69587-11-7
2,5-DIMETHOXY-4-METHYLPHENYLETHYLAMIN 2,5-二甲氧基-4-甲基* 24333-19-5
2,5-DiMethoxy-4-propylthiophenethylaMine 2,5-二甲氧基-4-正丙硫基* 207740-26-9
2,5-DiMethyl CyclopentanaMine  80874-82-4
2,5-DiMethylbenzylaMine 2,5-二甲基芐胺 93-48-1
2,5-DIMETHYLTEREPHTHALIC ACID 2,5-二甲基-1,4-苯二甲酸 6051-66-7
2,5-diMethylthiophene 2,5-二甲基噻吩 638-02-8
2,5-di-tert-Butylphenol 2,5-二叔丁基酚 5875-45-6
2,5-NORBORNADIENE 二環(huán)庚二烯 121-46-0
2,5-Oxazolidinedione,4-（phenylMethyl）-, （4S）- （S）-（-）-4-芐基氧氮雜環(huán)戊烷-2,5-二酮 14825-82-2
2,5-Pyrrolidinedicarboxylicacid, 1-（phenylMethyl）-, hydrochloride 1-芐基-2,5-吡咯烷二甲酸鹽酸鹽 325146-20-1
N-succiniMidyl propionate  30364-55-7
2,6,a,a-tetrachlorotoluene 2,6-二氯芐叉二氯 81-19-6
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。