上海天齊生物科技有限公司作者
阿魏酸的制備方法總的來說有3種,一是植物中直接提取,二是化學(xué)合成法,三是分離提純阿魏酸的方法,下面將詳細(xì)介紹這三種方法。
一、植物中直接提?。嚎赏ㄟ^三條途徑從植物中獲得阿魏酸:一是從阿魏酸與一些小分子的結(jié)合物中獲得,二是從植物細(xì)胞壁中獲得,三是通過組織培養(yǎng)獲得。 植物中阿魏酸多通過酯鍵與多糖和木質(zhì)素交聯(lián)或自身酯化或醚化形成二阿魏酸,一般用堿法和酶法打斷酯鍵釋放阿魏酸,再采用合適的溶劑進(jìn)行提取。
1、堿解法 :采用4%氫氧化鈉在通氮氣條件下常溫反應(yīng)24h,可釋放出細(xì)胞壁中出的阿魏酸。zui近研究發(fā)現(xiàn)通過提高提取溫度,并加入適合的保護(hù)劑,在較短時間內(nèi)就能將麥麩中大部分阿魏酸游離出來。歐仕益等采用低濃度的氫氧化鈉溶液,在適當(dāng)?shù)奶崛囟认履軐Ⅺ滬熤械拇蟛糠职⑽核後尫懦鰜?,提取過程中添加亞硫酸鈉可增加阿魏酸的回收率。由于堿液成分復(fù)雜,特別是含有色素物質(zhì),目前,堿液中阿魏酸的分離方法主要是采用活性炭吸附法。*中含有阿魏酸的結(jié)構(gòu)單元,以酯的形式存在,且易于分解,因此,可以先用堿水解*,再用酸化的方法制備阿魏酸,其反應(yīng)式水解*制備阿魏酸的操作方便,收率高達(dá)85.7%,副產(chǎn)品為環(huán)木菠蘿醇類。而且*來源廣、產(chǎn)量大,并且價格適中。
2、阿魏酸酯酶法 :阿魏酸酯酶是指能將阿魏酸甲酯、低聚糖阿魏酸酯和多糖阿魏酸之中阿魏酸游離出來的一種酶。真菌、細(xì)菌和酵母都能分泌阿魏酸酯酶。張璟等以黑曲霉作菌種,采用液體深層發(fā)酵法,制備出含有阿魏酸酯酶和阿拉伯木聚糖酶的混合酶制劑,采用混合酶制劑作用于去淀粉的麥麩,發(fā)現(xiàn)通過3次降解后麥麩降解率達(dá)55.46%。
3、植物組織培養(yǎng)法 :采用植物組織培養(yǎng)法是獲得阿魏酸的一條重要途徑。一些研究表明,對某些植物組織培養(yǎng)能使之產(chǎn)生較高產(chǎn)量的阿魏酸衍生物。如對糖甜菜、玉米進(jìn)行細(xì)胞懸浮培養(yǎng)能獲得水溶性的阿魏酸葡萄糖酯、阿魏酸蔗糖酯等,含量可高達(dá)20.0unol/g愈傷組織(干重)。直接提取物中,阿魏酸的含量比較低,需要進(jìn)一步的純化。
二、化學(xué)合成法:阿魏酸的化學(xué)合成法是以香蘭素為基本原料,主要應(yīng)用的有機反應(yīng)有Wittig-Horner反應(yīng)和Kneoevenagel反應(yīng)。
三、分離提純阿魏酸的方法 :
1、溶劑萃取法:常用的萃取阿魏酸的溶劑主要有乙醇、乙酸乙酯等。原理是利用對阿魏酸的溶解度大的溶劑萃取提取液中的阿魏酸,然后減壓蒸餾除去溶劑,從而獲得阿魏酸成品。此法工藝較簡單但收率較低,能耗較大,是提純阿魏酸zui常用的方法。
2、吸附法 :吸附法是目前研究比較多的一種提純方法。原理是通過加入吸附材料對溶液中的阿魏酸進(jìn)行吸附富集,然后采用洗脫劑洗脫吸附的阿魏酸。Couteau從活性炭、聚苯乙烯交聯(lián)樹脂、PVPP等吸附介質(zhì)中進(jìn)行了篩選,研究表明活性炭以其對阿魏酸高度的吸附能力(每100g吸附22g)、不結(jié)合單糖分子、容易洗脫等優(yōu)點為的吸附介質(zhì)。在活性炭吸附結(jié)束后,可以用乙醇把吸附的阿魏酸洗脫下來。另外活性炭也是一種優(yōu)良的吸附材料,提取液經(jīng)活性炭吸附后,當(dāng)活性炭達(dá)到吸附飽和之后,經(jīng)洗脫可以從提取液中獲得較純的阿魏酸。
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