2、結(jié)果
2.1　給藥途徑對胎盤組織IL26表達(dá)的影響陽性反應(yīng)主要位于絨毛膜層和其近蛻膜的區(qū)域。給藥后第1、2、3天,胎盤組織IL26表達(dá)水平,各給藥組低于相應(yīng)的對照組P<0.05,羊膜腔內(nèi)給藥組低于母鼠靜脈給藥組P<0.05,羊膜腔內(nèi)對照組高于母鼠靜脈給藥組P<0.05。其在給藥組給藥后第2天較低P<0.05,在對照組呈逐漸增長的趨勢P<0.05。
2.2　給藥途徑對胎盤組織MMP29表達(dá)的影響陽性反應(yīng)主要分布于絨毛膜層和靠近蛻膜的區(qū)域。胎盤MMP29表達(dá)水平在給藥后第1、2、3天,各給藥組低于各相應(yīng)對照組P<0.05,羊膜腔內(nèi)給藥組低于母鼠靜脈給藥組P<0.05,羊膜腔內(nèi)對照組高于母鼠靜脈對照組P<0.05。各組MMP29表達(dá)水平逐日升高P<0.05。
3　討論
IL26是一種多能炎性細(xì)胞因子,與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)。IL26產(chǎn)生于滋養(yǎng)細(xì)胞,且其受體也存在于滋養(yǎng)細(xì)胞表面,宮內(nèi)感染時,細(xì)菌侵犯羊膜腔,刺激蛻膜、羊膜和絨毛膜細(xì)胞及胎兒產(chǎn)生大量的IL26等細(xì)胞因子,可促使PGE分泌,引起子宮收縮和促進(jìn)宮頸成熟,引起早產(chǎn)。有學(xué)者認(rèn)為,IL26是感染的急性期反應(yīng)的標(biāo)志物,其水平甚至可以直接反應(yīng)病原體的侵入。本實驗結(jié)果顯示,給藥組胎盤組織IL26表達(dá)水平較低,是為*鈉抗菌作用的體現(xiàn)。給藥途徑不同,導(dǎo)致了羊水即時藥物濃度和其峰值以及藥物代謝過程的差異,我們推測,羊膜腔內(nèi)給藥后,羊水中的藥物濃度瞬時升高至峰值,并可通過擴散、轉(zhuǎn)運以及羊膜的析出等方式達(dá)胎盤,迅速抑制宮內(nèi)大腸埃希菌的生長和繁殖,從而減輕感染帶來的炎癥反應(yīng),因此,羊膜腔內(nèi)給藥組胎盤組織IL26表達(dá)水平均低于母鼠靜脈給藥組,而羊膜腔穿刺對宮內(nèi)環(huán)境的影響是羊膜腔內(nèi)對照組較母鼠靜脈對照組更高表達(dá)的主要原因。
IL26參與妊娠的全過程,并隨孕期而增長,其在孕中、晚期保持一種相對穩(wěn)定的水平,在分娩發(fā)動前明顯升高。本研究顯示,給藥后由于抗菌素的作用,胎盤組織IL26表達(dá)于給藥后第2天較低,此后呈增長態(tài)勢,對照組炎性反應(yīng)程度逐漸增強,IL26水平逐漸上升,這與前人的研究結(jié)果保持一致。
基質(zhì)金屬蛋白酶MMPs是一族內(nèi)源性蛋白水解酶,能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)的多種成分,參與細(xì)胞外基質(zhì)的代謝,與組織重塑有關(guān),并通過調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)的含量和胎膜結(jié)構(gòu),與胎膜破裂關(guān)系密切。MMP29激活后,促進(jìn)包括Ⅳ型膠原在內(nèi)的胞外基質(zhì)快速崩解引發(fā)細(xì)胞發(fā)生形態(tài)學(xué)變化和引發(fā)凋亡,其在分娩、破膜、羊膜腔感染的羊水標(biāo)本中明顯升高。與IL26表達(dá)差異原因相同,給藥組MMP29表達(dá)水平較低,羊膜腔內(nèi)給藥組低于母鼠靜脈給藥組,羊膜腔內(nèi)對照組高于母鼠靜脈對照組。Locksmith[8]認(rèn)為,從孕中期至孕末期MMP29一直處于相對穩(wěn)定的較低水平,MMP29的出現(xiàn)和快速增高預(yù)示著胎膜即將破裂。又有學(xué)者指出感染或炎癥過程中產(chǎn)生的IL26等分泌增加可以誘導(dǎo)或激活MMP29活性,故本實驗各組胎盤MMP29表達(dá)水平逐日增高是感染炎癥刺激和妊娠進(jìn)展共同作用的結(jié)果。
目前,羊膜腔途徑給藥作為侵入性操作尚未被臨床廣泛采用,僅胎兒宮內(nèi)換血治療被認(rèn)可,宮內(nèi)操作導(dǎo)致宮內(nèi)感染風(fēng)險增加以及胎兒胎盤損傷、早產(chǎn)等副作用使得羊膜腔給藥途徑的研究和應(yīng)用滯后,上尚無羊膜腔內(nèi)給藥治療宮內(nèi)感染的實驗及臨床研究。然而,羊膜腔途徑給藥可以繞過胎盤屏障直接進(jìn)入羊水,羊膜腔內(nèi)注射氨基酸治療胎兒宮內(nèi)生長受限成功的報道更堅定了我們探討羊膜腔內(nèi)給藥治療細(xì)菌性宮內(nèi)感染的決心。本實驗結(jié)果提示,單次*鈉給藥治療晚孕SD大鼠大腸埃希菌宮內(nèi)感染,羊膜腔內(nèi)較母鼠靜脈途徑更有效,其可通過抑制IL26和MMP29在胎盤組織中的表達(dá)水平,降低炎癥反應(yīng)程度和胎膜早破的風(fēng)險。