使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

產(chǎn)品名稱：艱難梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒
英文名稱：Clostridium difficilePCR
編號：XG-P1254
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分：

技術(shù)原理：

       DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

粘液酸鹽測試肉湯0支

GC瓊脂 250g 用于淋球菌的分離培養(yǎng)(OXOID方法)

TTC營養(yǎng)瓊脂 TTC Nutrient Agar 250 用于細(xì)菌總數(shù)測定

淀粉培養(yǎng)基250g/瓶用于細(xì)菌淀粉水解試驗(yàn)incubationmedia淀粉培養(yǎng)基250g/瓶用于細(xì)菌淀粉水解試驗(yàn)

NA平板(加酶)(9cm) 10個(gè)/包 細(xì)菌計(jì)數(shù)、不含糖，可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用GDX　105(聚二本多孔小球)GDX 105,Polydivinylbenzene porous beads40-60目25g

PM035φ35mm 細(xì)胞培養(yǎng)皿175

E0245-100GEDTA 4Na 以兒按四乙酸四鈉13235-36-4100g

Calconcarboxylic acid5g

三錄乙酸100gIL1RL1 Others Mouse 小鼠 IL1RL1 / ST2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞裂解物HUASMCL

615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C4 III型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL

MGC80-3(MGC-803)人胃癌細(xì)胞 Human

CA9 Others Mouse 小鼠 CAR9 / CAIX / CA9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
艱難梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒Solidmedium

ES級別胎牛血清 經(jīng)過ES細(xì)胞的培養(yǎng)測試，讓您培養(yǎng)ES細(xì)胞時(shí)無需再預(yù)實(shí)驗(yàn)試批號 新西蘭 30044-333 500ml incubation media ES級別胎牛血清 經(jīng)過ES細(xì)胞的培養(yǎng)測試，讓您培養(yǎng)ES細(xì)胞時(shí)無需再預(yù)實(shí)驗(yàn)試批號 新西蘭 30044-333 500ml

燼灰鏈霉菌 石油脫蠟 支/瓶

ModifiedCCDAAgar

乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基 250g 用于大腸菌群發(fā)酵試驗(yàn)3-氯-4-甲苯胺(標(biāo)準(zhǔn)品)  進(jìn)口分裝  SW-13(人上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞)

優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 150)  進(jìn)口分裝  人結(jié)腸癌細(xì)胞

二甲基亞砜(藥用級)  進(jìn)口分裝  人惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

柱層層析硅膠(60-80目 180-250um)  進(jìn)口分裝  俄勒岡地鼠IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)

JAR 人胎盤絨毛癌細(xì)胞

RWPE-1人正常前列腺上皮細(xì)胞 RWPE-1 of normal human prostate epithelial cells K-SFM+0.05mg/ml BPE+5ng/ml EGF

FIGF Protein Human 重組人 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠神經(jīng)黑質(zhì)細(xì)胞(MN-sn)(1×106) T24, 人膀胱癌細(xì)胞 Human

產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。