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初級(jí)會(huì)員 | 第6年

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原代細(xì)胞與細(xì)胞系該如何選?

時(shí)間:2020/8/3閱讀:372
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原代細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,一般認(rèn)為,原代細(xì)胞培養(yǎng)的第1代和傳代到第10代以內(nèi)統(tǒng)稱為原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)出現(xiàn)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)”而繼續(xù)傳下去,這些存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代,這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞株。當(dāng)細(xì)胞傳至50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)”,這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn),從而可能無(wú)限制地傳代下去,這種傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞系。

細(xì)胞系因其容易培養(yǎng)、種類多、產(chǎn)量可觀的優(yōu)點(diǎn)一直是細(xì)胞水平研究,且價(jià)格相對(duì)低廉,但細(xì)胞系“價(jià)廉卻不一定物美”。研究發(fā)現(xiàn),細(xì)胞系在連續(xù)培養(yǎng)的過(guò)程會(huì)不斷發(fā)生突變,長(zhǎng)時(shí)間的多次傳代可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞系的基因型和表型都發(fā)生變化,從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。例如有研究報(bào)道,HEK293經(jīng)腺病毒轉(zhuǎn)染后得到的細(xì)胞更接近未成熟神經(jīng)元細(xì)胞;MDA-435作為乳腺癌細(xì)胞被廣泛用于各種研究,但近年來(lái)越來(lái)越多證據(jù)表明其可能為一種黑色素瘤細(xì)胞。

原代細(xì)胞則不存在這些問(wèn)題,雖然原代細(xì)胞分離和培養(yǎng)的成本可能相對(duì)更高,但原代細(xì)胞作為更接近體內(nèi)環(huán)境的研究模型,可讓你的研究結(jié)論更加接近“事實(shí)”,且原代細(xì)胞的使用可減少動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所需的成本開(kāi)支。另外在某些人體體內(nèi)無(wú)法進(jìn)行的實(shí)驗(yàn),原代細(xì)胞因其高度保持了在體內(nèi)的生物學(xué)特性,可在一定程度解決這個(gè)問(wèn)題。

由于永生化的細(xì)胞系與體內(nèi)組織細(xì)胞的生物特性相差甚遠(yuǎn),導(dǎo)致許多生理和病理的過(guò)程難以重復(fù),近年來(lái),原代細(xì)胞正逐步成為細(xì)胞和分子生物學(xué)研究的工具,為疾病機(jī)制、藥物研發(fā)等提供了高質(zhì)量的模型。但不可能否認(rèn)的是,細(xì)胞系在科研中的地位仍十分重要,例如在標(biāo)準(zhǔn)化方案的確立上細(xì)胞系是良好的工具,某些需要大量細(xì)胞的研究如全基因組遺傳篩選,由于原代細(xì)胞數(shù)量有限且對(duì)培養(yǎng)條件要求苛刻,細(xì)胞系也是。

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