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初級(jí)會(huì)員 | 第6年

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靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)操作步驟

時(shí)間：2024/11/25閱讀：34
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　　原代細(xì)胞培養(yǎng)是將機(jī)體內(nèi)的某組織取出，分散成單細(xì)胞，在人工條件下培養(yǎng)使其生存并不斷生長(zhǎng)、繁殖的方法。借助這種方法可以觀察細(xì)胞的分裂繁殖、細(xì)胞的接觸抑制、以及細(xì)胞的衰老，死亡等生命現(xiàn)象。靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)：
 
　　1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
 
　　2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
 
　　3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
 
　　4、 胎牛血清濃度為10%-80%；
 
　　5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
 
　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
 
　　7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
 
　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

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