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技術(shù)文章

PCR實(shí)驗(yàn)室污染分類(lèi)

閱讀:1862          發(fā)布時(shí)間:2020-12-17

樣本間交叉污染

主要是在采(?。拥倪^(guò)程中,由于取樣工具之間的交叉造成污染;或者在核酸提取的過(guò)程中,由于移液器、離心管等使用不當(dāng)導(dǎo)致的污染。 

PCR試劑的污染

主要是在PCR試劑配制過(guò)程中,由于移液器、容器、陰性對(duì)照及其它試劑被核酸模板或陽(yáng)性對(duì)照污染。

克隆質(zhì)粒的污染

在實(shí)驗(yàn)室操作中經(jīng)常會(huì)用到陽(yáng)性參考品,這些陽(yáng)性參考品大多數(shù)是由某些克隆質(zhì)粒制作而成,克隆質(zhì)粒在單位容積內(nèi)濃度高,不小心使用極易造成污染。

PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染

這是PCR反應(yīng)中zui主要zui常見(jiàn)的污染問(wèn)題。因?yàn)镻CR產(chǎn)物拷貝量大,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR檢測(cè)數(shù)個(gè)拷貝的極限,所以極微量的PCR產(chǎn)物污染,就可造成假陽(yáng)性結(jié)果。還有一種容易忽視,zui可能造成PCR產(chǎn)物污染的形式是氣溶膠污染,在空氣與液體面摩擦?xí)r就可形成氣溶膠,據(jù)計(jì)算一個(gè)氣溶膠顆粒可含4.8萬(wàn)拷貝,因而由其造成的污染是一個(gè)值得特別重視的問(wèn)題。

 

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