為確保試驗(yàn)的成功,使用人白細(xì)胞調(diào)節(jié)素(LR)ELISA試劑盒時(shí)必定要注意相關(guān)的事項(xiàng),快來看一下這個(gè)操作步驟看你過去用用對嗎?
1, 確認(rèn)本次檢測所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目。
2, 將倍比稀釋的規(guī)范品各0.1ml順次參加一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為對照。處理后的標(biāo)本按100ul每孔參加。
3, 酶標(biāo)板加上蓋,37℃反響90分鐘。
4, 反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對著吸水紙拍幾下。洗刷2次。

5,將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔0.1ml順次參加。37℃反應(yīng)60分鐘。
6, 0.01M TBS或0.01M PBS洗刷3次,每次浸泡1分鐘左右。
7,將準(zhǔn)備好的ABC工作液按每孔0.1ml順次參加。37℃反響30分鐘。
8, 0.01M TBS或0.01M PBS洗刷5次,ELISA試劑盒每次浸泡1-2分鐘左右。
9, 按每孔0.1ml順次參加TMB顯色工作液,37℃避光反響,反響過程中,要常常的調(diào)查,當(dāng)肉眼可見規(guī)范品的前3-4孔有顯著的梯度藍(lán)色,后3-4孔不同不顯著時(shí),即可參加TMB停止液0.1ml/孔。(顯色反響長不要超越30分鐘)。
10,用酶標(biāo)儀在450nm測定O.D.值。
11,根據(jù)樣品的吸光值在坐標(biāo)上找出對應(yīng)的濃度。用戶也能夠使用各種應(yīng)用軟件來核算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了N倍,其實(shí)際濃度應(yīng)該×N。
為了確保試驗(yàn)的成功進(jìn)行和結(jié)果準(zhǔn)確,大家一定要嚴(yán)格遵守人白細(xì)胞調(diào)節(jié)素(LR)ELISA試劑盒的使用規(guī)程。