兔子催乳素（PRL）ELISA試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。預(yù)先包被的抗體為催乳素(PRL/LTH)單克隆抗體，檢測相抗體為多克隆抗體，經(jīng)標(biāo)記。樣品和標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，經(jīng)PBS或TBS洗滌，隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過PBS或TBS的洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
使用兔子催乳素（PRL）ELISA試劑盒前要做好這些準(zhǔn)備工作：
1、請(qǐng)?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫后方可進(jìn)行試驗(yàn)；
2、將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回。
3、標(biāo)準(zhǔn)品:加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.0ml至凍干標(biāo)準(zhǔn)品中，靜置10分鐘，待其充分溶解后，輕輕混勻，之后在管身標(biāo)注①，然后根據(jù)需要進(jìn)行稀釋注意：務(wù)必要保證凍干標(biāo)準(zhǔn)品溶解和混勻。
4、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋方法：取7支潔凈的試劑管，分別標(biāo)注②,③,④,⑤,⑥,⑦,⑧.每管加入300μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液。從第①管內(nèi)取出300μl加入到第②管，混勻后，再從第②管取出300μl加入到第③管，以此類推至第⑦管。第⑧管為標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，作為陰性對(duì)照使用。
5、抗體工作液：按當(dāng)次試驗(yàn)所需用量，用抗體稀釋液稀釋濃縮化抗體(1:100)，配置成化抗體工作液。使用前30分鐘準(zhǔn)備，僅供當(dāng)日使用。
6、酶結(jié)合物工作液：按當(dāng)次試驗(yàn)所需要用量，用酶結(jié)合物稀釋液稀釋濃縮酶結(jié)合物(1:100)，配置成酶結(jié)合物工作液。使用前30分鐘準(zhǔn)備，僅供當(dāng)日使用。
7、TMB顯色工作液：在使用兔子催乳素（PRL）ELISA試劑盒使用之前30分鐘，按TMB顯色液Ax9份加TMB顯色液Bx1份（9：1）的比例配制TMB顯色工作液。
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