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南京億迅生物科技有限公司

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蔗糖磷酸化酶檢測試劑盒
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參考價(jià) 2135 1600
訂貨量 1 5
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號(hào)
  • 品牌
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 南京市

更新時(shí)間:2019-11-07 10:46:14瀏覽次數(shù):657

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【簡單介紹】
級(jí)別 其他
測定意義
SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中,裂解葡萄糖苷鍵,催化葡萄糖基轉(zhuǎn)移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等,合成相應(yīng)的葡萄糖基低聚糖。此外,SP還能催化氫醌合成熊果苷,具有美白效果,在化妝品工業(yè)中具有重要應(yīng)用。
蔗糖磷酸化酶檢測試劑盒

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測定原理

SP能夠以磷酸為受體,催化蔗糖產(chǎn)生1-磷酸葡萄糖,在葡萄糖磷酸變位酶催化下變位為6-磷酸葡萄糖,在6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下還原NADP+生成NADPH,導(dǎo)致340nm光吸收值增加。測定340nm吸光度增加速率,即可計(jì)算SP活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配制

提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存。

緩沖液:液體40mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體25mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體2mL×1支,4℃保存。

試劑三:液體1mL×1支,4℃保存。

試劑四:粉劑1瓶,-20℃避光保存,臨用前加5mL雙蒸水溶解。

試劑五:粉劑1瓶,-20℃避光保存,臨用前加5mL雙蒸水溶解。

試劑六:粉劑1瓶,-20℃避光保存,臨用前加10mL雙蒸水溶解。

試劑七:粉劑1瓶,-20℃避光保存,臨用前加10mL雙蒸水溶解。

粗酶液提取

發(fā)酵液4℃,10000rpm,離心15min,取菌泥約0.5g,加入1mL提取液,用超聲波進(jìn)行破碎,功率為300w,破碎3s,間歇5s,總時(shí)間為3min,然后4℃,12000rpm,離心10min,取20μL測定蛋白含量,其余的作為待測樣本。

測定操作表

 

對(duì)照管

測定管

緩沖液(μL

850

650

試劑一(μL

500

500

試劑二(μL

30

30

試劑三(μL

20

20

試劑四(μL

100

100

試劑五(μL

100

100

試劑六(μL

200

200

試劑七(μL

200

200

混勻,37℃水浴預(yù)熱5min

樣本(μL

 

200

迅速混勻,于1mL石英比色皿,對(duì)照管調(diào)零,測定340nm的初始值A1,測定完立即放入37℃水浴準(zhǔn)確反應(yīng)2min,迅速測定340nm吸光值A2,△A= A2- A1

 

注意事項(xiàng)

  1. 粉劑-20℃保存,配制好的試劑建議盡快使用。
  2. 可選用BCA法測定蛋白含量試劑盒測定蛋白含量。

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