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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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更新時(shí)間：2022-10-26 09:40:19瀏覽次數(shù)：409
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技術(shù)原理：產(chǎn)品僅用于科研
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
弗氏檸檬酸桿菌探針法檢測(cè)試劑盒 | Citrobacter freundii | BJ-P9414 |
產(chǎn)品特點(diǎn):
靈敏度高：可檢測(cè)個(gè)位拷貝數(shù)的基因
特異性高：有效避免非特異性擴(kuò)增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高：復(fù)孔間差異小，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性強(qiáng)
擴(kuò)增性能優(yōu)：擴(kuò)增效率高，熒光信號(hào)強(qiáng)
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為。
熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?/span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (100-1500 bp)50 次 G 鉀鹽溶液 ,200mg/mL1 Mu
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (100-5000 bp)50 次 親和硅烷 25mL
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (300-10000 bp)50 次 親和層析柱6 mL
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (2)（50-400 bp）50 次 親和層析柱50 mL
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (2)（300-5000 bp）50 次 親和層析柱30 mL
人白細(xì)胞分離液 1.078200mL 0.5mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)1個(gè)
人中性粒細(xì)胞分離液 1.085200mL 0.5mL DNA 離心超濾管 (30-50 KD)1個(gè)
人粒細(xì)胞分離液 1.113200mL 0.5mL DNA 離心超濾管 (150-250 KD)1個(gè)
小鼠腫瘤細(xì)胞分離液 1.070200mL
小鼠內(nèi)皮細(xì)胞分離液 1.071200mL
大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠精胺脲水解酶(AGMAT)elisa檢測(cè)試劑盒
倉(cāng)鼠白介素1β(IL-1β)elisa檢測(cè)試劑盒
倉(cāng)鼠白介素2(IL-2)elisa分析檢測(cè)試劑盒
倉(cāng)鼠白介素2(IL-2)elisa檢測(cè)試劑盒
倉(cāng)鼠白介素3(IL-3)elisa分析檢測(cè)試劑盒
倉(cāng)鼠白介素3(IL-3)elisa檢測(cè)試劑盒
弗氏檸檬酸桿菌探針法檢測(cè)試劑盒實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
