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原代細胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進行，以模擬體內溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應保持在7.2~7.4之間，以維持細胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進行，以促進細胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細胞簡介：

人關節(jié)軟骨分離自關節(jié)軟骨組織；關節(jié)軟骨屬于透明軟骨，表面光滑、呈淡藍色、有光澤，它是由一種特殊的叫做致密結締組織的膠原纖維構成的基本框架，這種框架呈半環(huán)形，類似拱形球門，其底端緊緊附著在下面的骨質上，上端朝向關節(jié)面，這種結構使關節(jié)軟骨緊緊與骨結合起來而不會掉下來，同時當受到壓力時候，還可以有少許的變形，起到緩沖壓力的作用。在這些纖維之間，散在分布著軟骨細胞，軟骨細胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細胞組成，這些軟骨細胞維持關節(jié)軟骨的正常代謝。關節(jié)軟骨沒有神經(jīng)支配，也沒有血管，其營養(yǎng)成分必須從關節(jié)液中取得，而其代謝廢物也必須排至關節(jié)液中，關節(jié)軟骨的這種營養(yǎng)代謝必須通過關節(jié)運動，使關節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行，所以關節(jié)運動對于維持關節(jié)軟骨的正常結構起重要的作用。關節(jié)軟骨細胞位于關節(jié)軟骨陷窩內。幼稚的關節(jié)軟骨細胞位于關節(jié)軟骨組織的表層，單個分布、體積較小、呈橢圓形，長軸與關節(jié)軟骨表面平行，越向深層的關節(jié)軟骨細胞體積之間增大呈圓形，細胞核圓形或卵圓形、染色淺，細胞質弱嗜堿性，常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的關節(jié)軟骨細胞多2-8個成群分布于關節(jié)軟骨陷窩內，這些關節(jié)軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成，稱為同源細胞群。電鏡下，關節(jié)軟骨細胞有突起和皺褶，細胞質內有大量的粗面內質網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中，關節(jié)軟骨細胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的關節(jié)軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡介：

公司實驗室分離的人關節(jié)軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質量檢測：

公司實驗室分離的人關節(jié)軟骨采用膠原酶聯(lián)合蛋白酶消化制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每3-4天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細胞。

?細胞計數(shù)?：使用血細胞計數(shù)器或其他方法對細胞進行計數(shù)，確保細胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當細胞達到一定密度時進行傳代培養(yǎng)，以維持細胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠抑制素A(INH-A)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human granulysin (granulysin) ELISA Kit 人顆粒溶素(granulysin)ELISA試劑盒

HumanGasinELISAKit 人胃泌素(Gasin)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

CLIAKitfor6-K-PGELISAKit大鼠6同前列腺素規(guī)格：48T/96T

飲料D-蘋果酸比色法定量檢測試劑盒20次

MousemammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit小鼠癌標志物-CA153ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

血管緊張素轉化酶   英文名稱：   Angiotensin Conveing Enzyme   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ACE

膜聯(lián)蛋白2   英文名稱：   Annexin 2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ANXA-2

骨堿性0酸酶   英文名稱：   bone alkaline phosphatase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   BALP

凋亡因子BAX   英文名稱：   apoptogen BAX   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   BAX

大鼠復制蛋白A 70kDaDNA結合亞基(RPA1)ELISA試劑盒 ，英文名： RPA1 ELISA Kit

Porcine methemoglobin (MHB) ELISA Kit 豬高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒

轉基因植物Sad1基因核酸檢測試劑盒 48T

CLIAKitforMBP(Mousemyelinbasicprotein)ELISAKit小鼠髓0脂堿性蛋白規(guī)格：48T/96T

體液氧化型(GSSG)濃度比色法定量檢測試劑盒50次

ELISAKitLp-PL-A2脂蛋脂酶A2規(guī)格：48T/96T

CPM重組小鼠 Carboxypeptidase M / CPM 蛋白 (His 標簽) Protein

β-血小板球蛋白(βTG)重組蛋白 Recombinant Beta-Thromboglobulin (bTG)

PRTFDC1重組人 PRTFDC1 蛋白 (His 標簽) Protein

CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標簽)

CD63 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白 (His 標簽)

人關節(jié)軟骨細胞肝脂酶(LIPC)重組蛋白 Recombinant Lipase, Hepatic (LIPC)

CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標簽)

BGN重組小鼠 Biglycan / PG-S1 / BGN 蛋白 (Fc 標簽) Protein

THPO Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標簽)

PDHA1重組人 PDHA1 / C54G1 蛋白1 (aa 30-390) Protein

原代細胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。