　　分子結(jié)構(gòu)：一般性質(zhì)：外觀：深紅色粉末分子量：631.67質(zhì)譜分析M+增量：516.2分子式：C37H33N3O7CAS號(hào)：117491-83-5溶解性：易溶于有機(jī)溶劑（DMF,DMSO），略溶于水質(zhì)控：NMR1H（95%）和13C,TLC,功能測試

　　分子結(jié)構(gòu)：一般性質(zhì)：外觀：暗藍(lán)色粉末分子量：616.19分子式：C36H42ClN3O4溶解性：易溶于有機(jī)溶劑（DMF,DMSO和氯化物），難溶于水質(zhì)控：NMR1H（95%）和13C,TLC，功能測試

　　另外，Cy5，Cy5.5和Cy7的吸收在近紅外區(qū)背景非常低，熒光強(qiáng)度高、穩(wěn)定的長波長染料。特別適合于活體小動(dòng)物體內(nèi)成像代替放射性元素。但由于菁染料，尤其是不對(duì)稱菁染料的合成副反應(yīng)多，副產(chǎn)物極性相近，產(chǎn)物的分離提純相當(dāng)復(fù)雜。

　　Cy3.5NHS酯是標(biāo)記多肽，蛋白和寡核苷酸的活性染料Cy3.5NHS酯可替代AlexaFluor594,DyLight594的NHS酯

　　光譜性質(zhì)：大激發(fā)波長：673nm在大激發(fā)波長下的消光系數(shù)：209000Lmol-1cm-1大發(fā)射波長：707nm熒光量子產(chǎn)率：0.2

　　F/P值分別是0.28:1,1.16:1,2.3:1和4.6:1。

　　F/Pfinal=[dye]/[peptide]={0.68×A650}/{A280-(0.05×A650)}

　　5.用0.1MNaHCO3稀釋少量的抗體，在280nm處測其紫外吸收值計(jì)算標(biāo)記抗體的總量(IgGantibody

　　Cy5.5NHS酯標(biāo)記多肽，蛋白和寡核苷酸的氨基Cy5.5NHSester：是近紅外染料，除了用于標(biāo)記多肽，蛋白和寡核苷酸氨基的活性染料，可用于后續(xù)的小動(dòng)物活體成像實(shí)驗(yàn)。染料可代替AlexaFluor680NHSester和DyLight680NHSester

　　000M-1cm-1;Cy5在280nm處的吸收是650nm處的5%。按以下公式計(jì)算F/P值。

　　不同蛋白的摩爾吸光系數(shù)不一樣;.Cy3染料本身在280nm的吸收是552nm處的8%。按以下公式計(jì)算F/P

　　3.用HPLC純化蛋白，使用蛋白C18柱子(25cm×10mm)，每次上樣注入2×400μL，30分鐘梯度洗脫

　　從0.1%TFA水溶液到MeCN∶H2O(0.1%TFA)=70∶30，流速4mL/min。(對(duì)不同的蛋白選擇不

　　脫鹽，用5.0mMborate緩沖液平衡到pH=8.0，然后用以上硼酸緩沖液沖下OLIGO。然后濃縮至干的樣

　　1.在1L0.15MNaCl溶液中透析anti-GST抗體(濃度為0.5mLat3mg/mL)，常溫透析4小時(shí)。

　　分子結(jié)構(gòu)：

　　F/P計(jì)算：

　　 Cy7檢測時(shí)激發(fā)波長700～770nm帶通,發(fā)射波長790nm長通。液晶可調(diào)諧濾光片掃描范圍780～

　　3.1水溶性Cy3NHS標(biāo)記anti-GST多克隆抗體

　　[Cy5dye]=(A650)/250000

　　2.菁染料琥珀酰亞胺酯(CyDyeNHS)的標(biāo)記

　　注意：Oligonucleotides和oligopeptides由于太小經(jīng)常會(huì)留在過濾膜上或在凍存管內(nèi)貼壁

　　4.用0.22μm注射器過濾頭過濾抗體溶液。

　　未開封的粉末在避光干燥-20℃存放12月。CyDyeNHS水溶液現(xiàn)配現(xiàn)用不能儲(chǔ)存。任何溶解后的CyDye

　　ROX（羅丹明X又叫R101）是具有多種用途的高熒光性，不感光的羅丹明染料。ROX標(biāo)記的寡核苷酸探針經(jīng)常被用于qPCR及具有ROX通道的qPCR設(shè)備標(biāo)記多肽，蛋白和氨基-寡核苷酸的活性染料，此染料可代替AlexaFluor568

　　分子結(jié)構(gòu)：一般性質(zhì)：外觀：暗紫色粉末分子量：732.35分子式：C45H50ClN3O4溶解性：溶于有機(jī)溶劑（DMF,DMSO，二氯甲烷），不溶于水質(zhì)控:NMR1H（95%）和13C,TLC，功能測試

　　一般性質(zhì)：外觀：深藍(lán)色粉末分子量：716.31分子式：C44H46ClN3O4溶解性：溶于有機(jī)溶劑（DMSO,DMF,二氯甲烷），在水中不易溶解質(zhì)控：NMR1H(95%)13C,TLC,功能測試

　　8.在4°C用新鮮的1L0.15MNaCl溶液再避光透析過夜。

　　光譜性質(zhì)：大激發(fā)波長：591nm在大激發(fā)波長下的消光系數(shù)：116000Lmol-1cm-1熒光量子產(chǎn)率：0.35

　　后避光保存。

　　光譜性質(zhì)：大激發(fā)波長：646nm在大激發(fā)波長下的消光系數(shù)：250000mol-1cm-1大發(fā)射波長：662nm熒光量子產(chǎn)率：0.2

　　滌掉所有的殘余氨水。然后將樣品真空干燥;然后溶于0.25ml的0.5MNaCl溶液中，用SephadexG-50

　　11.用0.01MPBS/0.01%N3 化鈉整數(shù)倍稀釋標(biāo)記抗體溶液，測量280nm(蛋白)和552nm(Cy)處

　　分子的生物活性，標(biāo)記生物分子用單琥珀酰亞胺酯較合適，但是用雙修飾的CyDyeNHS并沒有發(fā)現(xiàn)交聯(lián)。

　　5.產(chǎn)品冷凍干燥成粉末或在水溶液中，-20℃避光儲(chǔ)存;必要時(shí)可用質(zhì)譜表征。

　　Cy3NHS酯是標(biāo)記生物分子氨基的活性染料，此試劑可標(biāo)記溶解蛋白，多肽和寡核苷酸/DNA。對(duì)于比較敏感的蛋白請(qǐng)選擇無需任何共溶劑的，可溶于水的磺酸基-Cy3NHS酯。

　　Cy5在生命科學(xué)研究和診斷領(lǐng)域是非常常用的熒光團(tuán)。此熒光團(tuán)在紅色區(qū)域有大發(fā)射，許多CCD檢測器有大靈敏度。Cy5NHS酯是標(biāo)記多肽，蛋白和寡核苷酸的活性染料。染料需要少量的有機(jī)共溶劑（比如DMF和DMSO）溶解后進(jìn)行標(biāo)記反應(yīng)。此試劑可以標(biāo)記溶解蛋白和各種多肽，寡核苷酸的氨基。對(duì)于易降解的蛋白，不可使用DMF或DMSO，應(yīng)選擇我們的不需任何共溶劑的sulfo-Cy5NHS酯，兩者具有非常相似的熒光特性。

　　CyDyemono-reactiveNHSEsters(菁染料琥珀酰亞胺酯)

　　長度,可改變其熒光發(fā)射波長，每增加一個(gè)雙鍵，按照Huoffman規(guī)則正好紅移約100nm。

　　光譜性質(zhì)：大激發(fā)波長：555nm在大激發(fā)波長下的消光系數(shù)：150000Lmol-1cm-1大發(fā)射波長：570nm熒光量子產(chǎn)率：0.31

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