細(xì)胞：3T3F442A細(xì)胞
中文名稱：小鼠脂肪細(xì)胞
生長特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：DMEM-H +10%CS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細(xì)胞(注意把握消化時間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；)
如果僅僅將自我更新因子去除，干細(xì)胞還是會停留在自我更新狀態(tài)。只有加入了Mbd3細(xì)胞才會開始分化為特定的細(xì)胞，有助于了解小鼠胚胎干細(xì)胞和人類胚胎干細(xì)胞之間的不同。小鼠胚胎干細(xì)胞需要蛋白LIF以幫助自我更新；
(大鼠L6細(xì)胞 成肌細(xì)胞)(小鼠LA795細(xì)胞 肺腺癌細(xì)胞)
人類胚胎干細(xì)胞中不需要LIF。而Mbd3缺失的小鼠胚胎干細(xì)胞則出現(xiàn)像人類干細(xì)胞的現(xiàn)象：不需要LIF以進行自我復(fù)制。因此這種胚胎干細(xì)胞可以作為一種人類干細(xì)胞研究模式，因為它不要LIF以繼續(xù)復(fù)制。
(小鼠LtK-11細(xì)胞 結(jié)締組織細(xì)胞)(兔N/N1003A細(xì)胞 晶體上皮細(xì)胞)
Mbd3是重塑核小體與組蛋白去乙酰化復(fù)合物其中的一部分。此復(fù)合物起到表觀沉默作用，在細(xì)胞中對基因表達進行調(diào)控；
