細(xì)胞:THLE-2細(xì)胞
中文名稱:人肝細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:BEGM(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
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蛋白Mbd3對胚胎干細(xì)胞分化成為特定細(xì)胞,如:腦細(xì)胞或者皮膚細(xì)胞具有重要作用。這一成果使人們進一步認(rèn)識干細(xì)胞如何分化成為特定細(xì)胞,從而對干細(xì)胞治療有推進作用。
(小鼠3T3細(xì)胞 胚胎成纖維細(xì)胞)(兔CCC-SMC-2細(xì)胞 平滑肌細(xì)胞)
制作缺失Mbd3蛋白的小鼠胚胎干細(xì)胞,這種干細(xì)胞會喪失分化成為特定細(xì)胞的能力。將這種細(xì)胞注射進入小鼠的早期胚胎種,這類缺陷的細(xì)胞還是存在功能缺陷,并且破壞了胚胎的正常發(fā)育。
(人Hela S3細(xì)胞 癌細(xì)胞)(人HPAC細(xì)胞 上皮癌細(xì)胞)
已知胚胎干細(xì)胞需要特定的因子以不斷復(fù)制生成干細(xì)胞,也就是自我更新。證明當(dāng)干細(xì)胞從自我更新狀態(tài)變?yōu)榉只癄顟B(tài)需要Mbd3蛋白的表達。
(人HuT 78細(xì)胞 淋巴細(xì)胞)(人L1210細(xì)胞 淋巴細(xì)胞)