細(xì)胞:MDA-MB-453細(xì)胞
中文名稱:人乳腺癌細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:L15+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
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一種酶參與負(fù)責(zé)記憶思考的大腦皮質(zhì)層的形成
大腦表層分布的負(fù)責(zé)記憶和思考的大腦皮質(zhì)在形成過程中,蛋白質(zhì)的磷酸酶“Cdk5”具有重要作用。這一發(fā)現(xiàn)對了解關(guān)于記憶學(xué)習(xí)機制以及阿爾察默病治療具有重要意義。
大腦皮層具有規(guī)則的六層結(jié)構(gòu),神經(jīng)細(xì)胞增殖后自動移動到各自位置,在移動過程中,從具有很多突起的多極性形態(tài)逐漸變化成僅有兩個突起的雙極性形態(tài)。
形成大腦皮質(zhì)的錐形神經(jīng)細(xì)胞的一個長樹狀突起向腦表層伸展,科學(xué)家目前并不了解這種形態(tài)是如何形成。
為了揭示神經(jīng)細(xì)胞移動及形態(tài)變化的機制,研究小組使用細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)磷酸氧化酶之一的“Cdk5”進(jìn)行試驗。
試驗中,研究小組人為降低了小鼠胎兒“Cdk5”機能,發(fā)現(xiàn)神經(jīng)細(xì)胞不會從多極變化為雙極,“Cdk5”缺失的小鼠沒有雙極性神經(jīng)細(xì)胞,錐體型神經(jīng)細(xì)胞尖_端突起不向腦表面延伸。
研究人員據(jù)此認(rèn)為,與正常小鼠相比,缺少“Cdk5”的小鼠的大腦皮質(zhì)不能隨神經(jīng)細(xì)胞移動出現(xiàn)形態(tài)變化,并且伸展在大腦表面的樹狀突起的形成發(fā)生了障礙。由此也證明,“Cdk5”在大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞的形態(tài)變換中起到重要作用。