細胞：ZR-75-30細胞
中文名稱：人乳腺導管癌細胞
生長特性：貼壁細胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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腫瘤基因組穩(wěn)定性新機制
一個細胞分裂(cell pision)繁殖一次，它所有的DNA就要復制一次。而DNA復制的工具受損，或引起DNA修復損傷則可導致DNA復制壓力。
腫瘤細胞繁殖的速度快，要在更短的時間內繁殖同樣數(shù)量的DNA，引起復制損傷的幾率就更大。
在此前的研究中，該研究組曾發(fā)現(xiàn)了染色體斷裂的機制，染色體“脆性位點”(基因組特定區(qū)域)在細胞分裂(cell pision)期顯示為間隙或不連續(xù)的間隔區(qū)，脆性位點在物種間保守，且該區(qū)域染色體易斷裂，推測其對腫瘤相關聯(lián)的錯誤基因組重排有影響。
健康的細胞基因組是穩(wěn)定的，基因組重排是導致健康細胞轉化為腫瘤細胞的一個重要因素之一；反過來，腫瘤細胞又需要基因組的穩(wěn)定性，否則腫瘤細胞就會死亡。”應頌敏說。
根據這項研究，腫瘤細胞用M期的修復機制維持了基因組的穩(wěn)定性，以滿足其存活和快速增殖的需要。
在腫瘤細胞中，癌基因誘導了DNA復制壓力，異常增殖的腫瘤細胞由于存在DNA復制壓力，它在“規(guī)定動作”的S期進行的DNA復制留下了很多的DNA損傷，使得DNA變得很不穩(wěn)定，導致了腫瘤細胞的基因組不穩(wěn)定性，進而驅動癌變。
近年來，肺癌等惡性腫瘤(malignant tumor)發(fā)病率不斷升高，目前的放療、化療等腫瘤治療手段對正常細胞傷害巨大。
有絲分裂期DNA復制的發(fā)現(xiàn)對包括核酸修復、復制和腫瘤等許多領域的研究將產生重要影響。
該發(fā)現(xiàn)是對脆性位點機制的重新審視，即脆性位點并非染色體真正斷裂，而是細胞分裂(cell pision)期新合成的DNA區(qū)域，它之所以看起來像斷裂，是因為新合成的DNA區(qū)域與染色體其他區(qū)域連接不緊密。
