細(xì)胞：MG-63細(xì)胞
中文名稱：人成骨肉瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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一種胰腺細(xì)胞能夠被誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化成產(chǎn)胰島素小島細(xì)胞
用新的產(chǎn)胰島素細(xì)胞來(lái)替換掉出錯(cuò)或損失掉的細(xì)胞一直是糖尿病研究的一個(gè)重點(diǎn)課題。之前的組織培養(yǎng)研究顯示，一種類型的胰腺細(xì)胞能夠被誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化成產(chǎn)胰島素小島細(xì)胞。
這些胰腺細(xì)胞不能在動(dòng)物模型中變成產(chǎn)胰島素細(xì)胞。但是，他們發(fā)現(xiàn)受傷的胰腺細(xì)胞很容易重生為健康的胰腺細(xì)胞——這對(duì)治療胰腺癌和炎癥具有重要意義。
胰腺由兩種具有不同功能的部件組成：產(chǎn)胰島素β細(xì)胞構(gòu)成的小島和由管細(xì)胞和腺細(xì)胞構(gòu)成的較大的外分泌部分。外分泌部分能產(chǎn)生酶并將其傳遞到負(fù)責(zé)消化的腸道。
糖尿病的病因是β細(xì)胞不能正常產(chǎn)生胰島素，而胰腺癌則常起源于外分泌部分。在特定情況下，組織培養(yǎng)的腺細(xì)胞也能合成胰島素。
發(fā)現(xiàn)對(duì)改變糖尿病研究的重點(diǎn)具有深遠(yuǎn)意義。β細(xì)胞本身是產(chǎn)生新β細(xì)胞最有前途的資源。研究的重點(diǎn)目前逐漸轉(zhuǎn)移到直接刺激活體動(dòng)物中小島細(xì)胞的生長(zhǎng)。
相比之下，一旦腺細(xì)胞被移除生物體外并進(jìn)行培養(yǎng)，它們則更可能變成其他細(xì)胞類型，其中就包括β細(xì)胞。因此，Stoffers的動(dòng)物模型和技術(shù)方法目前正被美國(guó)、歐洲和中國(guó)的研究者用于確定腺細(xì)胞能夠轉(zhuǎn)化成導(dǎo)管細(xì)胞和β細(xì)胞的條件。
賓州的這個(gè)研究組用一種能選擇性地只標(biāo)記胰腺細(xì)胞的特殊標(biāo)志物加工小鼠模型。然后，利用化學(xué)試劑或手術(shù)損傷小鼠的胰腺。
胰腺自己愈合或再生，并且特定的胰腺細(xì)胞標(biāo)志物可以通過(guò)顯微鏡來(lái)檢測(cè)。分析結(jié)果清晰地顯示，腺細(xì)胞和小島在活體動(dòng)物中的再生過(guò)程仍然是分開的。
