細(xì)胞：MDCK細(xì)胞
中文名稱：狗腎細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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一種作為寄主的生物可能需要依靠?jī)?nèi)部共生體才能生存下去，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)這種真菌需要生活在其細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的細(xì)菌才能進(jìn)行繁殖。
這種特殊的共生合作關(guān)系存在于真菌Rhizopus microsporus和生活在其細(xì)胞內(nèi)的細(xì)菌Burkholderia之間。
這兩個(gè)物種結(jié)合起來(lái)，能有效地分解水稻的幼苗作為它們的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，并造成水稻幼苗的枯萎。
研究小組之前的工作曾顯示，這種細(xì)菌在真菌對(duì)水稻幼苗表現(xiàn)出來(lái)的毒素方面起到了關(guān)鍵的作用：細(xì)菌產(chǎn)生了一種造成幼苗枯萎的植物毒素。
現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)了真菌需要細(xì)菌的第二種令人驚訝的原因，當(dāng)用抗生素殺死真菌中的細(xì)菌后，真菌細(xì)胞變得無(wú)法產(chǎn)生孢子了，這表明對(duì)于真菌的繁殖而言，細(xì)菌是必須的。
這一發(fā)現(xiàn)顯示孢子的產(chǎn)生依賴于另一種生物的存在。而當(dāng)再次將兩種生物結(jié)合起來(lái)形成共生關(guān)系后，孢子的產(chǎn)生就得到了恢復(fù)。
小組在了解共生細(xì)菌如何影響其宿主方面取得了進(jìn)展。利用激光槍和綠色熒光蛋白標(biāo)記物，科學(xué)家就可以探測(cè)到真菌中的細(xì)菌所在。盡管真菌失去了繁殖的掌控，但是內(nèi)部的細(xì)菌也提供了保護(hù)及獲取營(yíng)養(yǎng)的毒素。
