細(xì)胞:CT-26細(xì)胞
中文名稱:小鼠大腸癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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從實(shí)驗(yàn)鼠胚胎中取出胚胎干細(xì)胞,進(jìn)行基因改造,使它們發(fā)育成所需要的神經(jīng)細(xì)胞,再將這些細(xì)胞植入患帕金森氏癥的實(shí)驗(yàn)鼠腦部后,實(shí)驗(yàn)鼠的帕金森氏癥癥狀明顯減輕,并存活了2到3個(gè)月。
但在進(jìn)行人體試驗(yàn)之前,還要克服許多困難,例如如何防止干細(xì)胞在人體內(nèi)不斷增殖以至發(fā)展成腫瘤等。
科研人員從實(shí)驗(yàn)鼠和人的骨髓內(nèi)提取出一種特殊的干細(xì)胞,命名為“多能成體祖細(xì)胞”。
這類細(xì)胞植入實(shí)驗(yàn)鼠胚胎后,參與了幾乎所有機(jī)體組織的發(fā)育,分化成了各種類型的細(xì)胞。他們同時(shí)指出,這種干細(xì)胞分化成肝臟細(xì)胞相對(duì)容易,但要分化成心臟細(xì)胞則很困難。
一:能增強(qiáng)人們對(duì)胚胎干細(xì)胞應(yīng)用潛力的信心,使人相信胚胎干細(xì)胞的確能逆轉(zhuǎn)病情;
二:則可能使反對(duì)派人士更有理由認(rèn)為干細(xì)胞研究應(yīng)當(dāng)局限于成年干細(xì)胞,不需要克隆胚胎提取干細(xì)胞。不過(guò),大多數(shù)科學(xué)家認(rèn)為,這兩類研究都需要繼續(xù)進(jìn)行,互為對(duì)照補(bǔ)充。