細(xì)胞:U-87MG細(xì)胞
中文名稱:人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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地衣型子囊菌是藻菌共生的一類特殊真菌,只存在于地衣體中,是決定地衣物種形態(tài)的主要載體。目前全球約有地衣型子囊菌21000-28850種,其中中國(guó)已知約1766種。(人SW579細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人甲狀腺鱗癌細(xì)胞)
地衣型真菌的培養(yǎng)研究已經(jīng)開(kāi)展了近40年,但分離培養(yǎng)涉及到地衣的遺傳學(xué)、生理學(xué)和地衣化學(xué)等諸多領(lǐng)域,所以頗具難度,培養(yǎng)成功率往往不到1/10。(鼠CHO-K1細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)
對(duì)1183種地衣進(jìn)行培養(yǎng)分離嘗試,但只有493種被成功分離,其中30%來(lái)自子囊孢子、32%來(lái)自地衣體。
地衣型真菌的分離和活體培養(yǎng),對(duì)非共生下的這些地衣型子囊菌所產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物研究、藻菌分離后的重組、新技術(shù)鑒定地衣物種,以及地衣資源的開(kāi)發(fā)提供了廣闊的研究空間和發(fā)展前景。(小鼠MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆細(xì)胞)
目前已成功分離培養(yǎng)23種地衣型共生菌,通過(guò)利用建立的該項(xiàng)分離培養(yǎng)技術(shù),重點(diǎn)對(duì)瀕危種、模式種和有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值的地衣型真菌分離培養(yǎng),建立這些物種數(shù)據(jù)庫(kù)并與館藏憑證標(biāo)本關(guān)聯(lián),最終實(shí)現(xiàn)此項(xiàng)工作與國(guó)際接軌的目的。