細胞:T84細胞
中文名稱:人結直腸癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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研究通過了檢測肝硬化后期患者肝細胞的新陳代謝發(fā)明了一種可以延長那些等待肝臟移植的患者的生存時間的新療法。
全球肝病病例持續(xù)增長,特別是那些高脂肪飲食和肥胖問題的國家。(人H9細胞 來源:通派細胞庫 人T淋巴瘤細胞)迄今為止仍不清楚肝硬化后期導致肝細胞停止工作的罪魁禍首,而該研究通過檢測肝硬化不同階段的生化指標解決了這一問題。
該研究使用大鼠作為模型,模擬了人類的肝臟環(huán)境,特別是病理學特性。研究人員對模型的肝細胞樣本從化學和遺傳學方面進行了詳細的檢測,特別是細胞制造的三磷酸腺苷(ATP)在不同時期的變化。
(人H292細胞 來源:通派細胞庫 人肺癌細胞)
在正常肝細胞中,大多數(shù)ATP由線粒體通過一種稱為氧化磷酸化(Oxidative phosphorylation)的過程制造,而以往的研究表明,糖酵解(制造ATP的另一種形式)在患病肝細胞中非?;钴S。
(人ZR-75-1細胞 來源:通派細胞庫 人乳癌細胞)
線粒體制造ATP比糖酵解更高效,但當機體需要額外能量修復自身或應對危機時,兩種制造ATP的過程都會發(fā)生。同時,一些癌細胞幾乎只依靠糖酵解提供的能量,因此人們自然想到糖酵解與肝病的有關。
(大鼠SHZ-88細胞 來源:通派細胞庫 大鼠乳癌細胞)
肝硬化細胞中通過線粒體制造的能量會減少,以前多認為這是肝臟新陳代謝障礙的主要因素,而該研究發(fā)現(xiàn)線粒體通路的下調并不足以導致肝細胞新陳代謝障礙,糖酵解通路被上調以制造更多的能量才是原因;
(人H1299細胞 來源:通派細胞庫 人非小細胞肺癌細胞)
由此產(chǎn)生的代謝物使肝細胞在肝臟后期時不能維持這些糖酵解通路的產(chǎn)出,導致ATP的凈生產(chǎn)下降,繼而肝細胞無法使用糖酵解來維持能量生產(chǎn)。
這項發(fā)現(xiàn)可用于指導醫(yī)生使用針對糖酵解通路的藥物,延長患者的生存時間。