細(xì)胞：J82細(xì)胞
中文名稱：膀胱移行癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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成體細(xì)胞逆分化為干細(xì)胞只需改變四個(gè)基因
干細(xì)胞生物學(xué)研究中最大的一個(gè)問題就是克隆過程如何能讓成熟細(xì)胞恢復(fù)年幼，使它們回到胚胎細(xì)胞狀態(tài)。理想狀態(tài)就是找到一種方法將成年細(xì)胞之間轉(zhuǎn)化成胚胎干細(xì)胞，并且無需先創(chuàng)造出一個(gè)胚胎。(人U87 MG細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫(kù) 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞)
使胚胎干細(xì)胞擁有它們的因子是否還能重新編排成年細(xì)胞，使其行為像胚胎干細(xì)胞。他們確定出在小鼠胚胎干細(xì)胞中表達(dá)的24個(gè)基因并利用病毒載體將這些基因的額外拷貝引入從小鼠尾巴頂部獲得的皮膚細(xì)胞中。(猴RF/6A細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫(kù) 猴脈絡(luò)叢視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞)
當(dāng)他們將24個(gè)基因的額外拷貝都插入細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)，吸收了這些基因的小部分細(xì)胞確實(shí)表現(xiàn)出了胚胎干細(xì)胞的特征。但是只引入一個(gè)基因不能引發(fā)這種轉(zhuǎn)變。(人MRC-5細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫(kù) 人胚肺細(xì)胞)
通過排除法，研究組將候選基因刪減到了4個(gè)：當(dāng)將它們同時(shí)引入小鼠尾巴細(xì)胞中時(shí)，能夠產(chǎn)生出類似胚胎干細(xì)胞的克隆。(貓CRFK細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫(kù) 貓腎細(xì)胞)
這四個(gè)基因中的三個(gè)基因是之前已經(jīng)認(rèn)識(shí)的，它們是Oct4、Sox2和從c-Myc。這些基因都是早期胚胎和胚胎干細(xì)胞中的關(guān)鍵基因。(人BXPC-3細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫(kù) 人原位胰腺癌細(xì)胞)
這個(gè)基因是一種目前尚未知曉的在胚胎干細(xì)胞中起關(guān)鍵作用的轉(zhuǎn)錄因子。在此之前，還發(fā)現(xiàn)了干細(xì)胞自我更新關(guān)鍵因子Nanog；(大鼠BRL細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫(kù) 大鼠肝細(xì)胞)
引入這四個(gè)基因的細(xì)胞似乎具備了從胚胎衍生的胚胎干細(xì)胞的所有關(guān)鍵特征。它們?cè)谂囵B(yǎng)皿中形成了幾種類型的組織并在給免疫缺陷小鼠注射后形成了腫瘤。
