細(xì)胞:HuTu-80細(xì)胞
中文名稱:人十二脂腸腺癌細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
HuTu-80細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
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成梯度增加的拉伸刺激對成骨細(xì)胞膠原合成的影響
使用四點(diǎn)彎曲加載裝置研究機(jī)械拉伸對成骨細(xì)胞膠原合成的影響,在生理應(yīng)變范圍(500~1 500 με)研究了不同加載時間、不同應(yīng)變水平對成骨細(xì)胞膠原合成的影響。(小鼠Ana-1細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 小鼠巨噬細(xì)胞)
發(fā)現(xiàn)在500 με下的拉伸刺激提高了成骨細(xì)胞合成膠原的能力,而在1 000 με和1 500 με下的拉伸刺激使成骨細(xì)胞的膠原合成受到了明顯抑制(P<0.01);(人U-2 OS細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人骨肉瘤細(xì)胞)
設(shè)計了應(yīng)變成梯度增加的加載方式:使細(xì)胞在500 με加載一段時間后,將應(yīng)變增加到1 000 με加載同樣長的時間,最后將應(yīng)變增加到1 500 με加載同樣長的時間;(小鼠MFC細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 小鼠胃癌細(xì)胞)
在梯度加載實驗中發(fā)現(xiàn),成骨細(xì)胞接收到有利于其膠原蛋白合成的信號時,大量地吸收用于合成膠原的脯氨_酸,當(dāng)力學(xué)刺激變?yōu)橐种菩盘枙r,儲存在胞內(nèi)的3H-脯氨_酸又重新釋放回溶液中;(小鼠RM-1細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 小鼠前列腺癌細(xì)胞)
說明在應(yīng)變逐漸增加的加載過程中,細(xì)胞會進(jìn)行自我調(diào)節(jié)以適應(yīng)新的機(jī)械刺激.