細(xì)胞:BV2細(xì)胞
中文名稱:小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
BV2細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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丙酮酸氧化是決定胰島數(shù)目和β-細(xì)胞質(zhì)量的關(guān)鍵因素
同時(shí)也在胰島素免疫陽性,(小鼠GC-2細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 小鼠精原細(xì)胞)特胰島的內(nèi)分泌小細(xì)胞簇中看到數(shù)目的減少,意味著也減少了新生β-細(xì)胞的來源。這個(gè)新發(fā)現(xiàn)強(qiáng)調(diào)了β-細(xì)胞中控制葡萄糖代謝的途徑對(duì)于維持β-細(xì)胞質(zhì)量以及賀爾蒙和生長因子,例如胰高血糖素樣多肽1(GLP1)是同等重要的。
丙酮酸脫氫酶復(fù)合體不僅對(duì)于胰島素基因表達(dá)和葡萄糖刺激的胰島素分泌非常必要,(鼠C26細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 鼠結(jié)腸癌細(xì)胞)同時(shí)還直接影響β-細(xì)胞的生長和成熟,更闡明了葡萄糖代謝會(huì)直接調(diào)控β細(xì)胞質(zhì)量和可塑性。
這些發(fā)現(xiàn)顯示了葡萄糖代謝是調(diào)控β細(xì)胞質(zhì)量的主要調(diào)控因子,(人D407細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人色素上皮細(xì)胞)很可能是獨(dú)立的訊息傳遞路徑,例如可能不同于胰島素受體作用物2訊息傳遞路徑。
研究利用小鼠基因剔除的方式來研究丙酮酸脫氫酶復(fù)合體在胰臟β-細(xì)胞發(fā)育所扮演的角色。研究證明丙酮酸脫氫酶復(fù)合體直接影響β-細(xì)胞的細(xì)胞大小及可塑性。