細(xì)胞:H2452細(xì)胞
中文名稱:人間皮瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
H2452細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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Nature干細(xì)胞的穩(wěn)定性比想象的更高
人們一直以為人體胚胎干細(xì)胞應(yīng)用于醫(yī)療目的時(shí)可能存在著很大障礙。(通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng):CCRM-CEM細(xì)胞)研究報(bào)告表明,事實(shí)并非如此糟糕,在從生長(zhǎng)在培養(yǎng)皿中的人體干細(xì)胞系中對(duì)一些基因取樣時(shí),印記基因的狀態(tài)表現(xiàn)很正常。
而以前的研究工作表明,從小鼠胚胎中提取的胚胎干細(xì)胞的印記基因在表達(dá)模式上已經(jīng)發(fā)生了改變。
當(dāng)一些細(xì)胞被引入到生物個(gè)體以替代那些發(fā)生病變的細(xì)胞時(shí),(通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng):CBRH7919細(xì)胞)由于這些異常的基因表達(dá)可能影響這些細(xì)胞的發(fā)育能力或者其他功能,因此人們擔(dān)心這將在醫(yī)療應(yīng)用中產(chǎn)生大的麻煩。
對(duì)涉及到印記行為中的六個(gè)基因和三個(gè)其它的人類基因組區(qū)域進(jìn)行了檢查,發(fā)現(xiàn)它們?cè)谌梭w干細(xì)胞系中只有一個(gè)發(fā)生了非正常表達(dá)。
雖然在人體胚胎干細(xì)胞中可能有一些其它基因也會(huì)發(fā)生非正常表達(dá),(通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng):HBZY-1細(xì)胞)但目前的研究工作表明干細(xì)胞的穩(wěn)定性要高于預(yù)期程度。