細(xì)胞：M2-10B4細(xì)胞
中文名稱：小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
M2-10B4細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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一個(gè)重要的科學(xué)謎團(tuán)就是未成熟造血干細(xì)胞如何(和為什么)啟動(dòng)形成某種細(xì)胞所需的基因表達(dá)，而不是向著另外一條路線發(fā)展。知道這個(gè)控制關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子的路線對(duì)了解不同干細(xì)胞如何形成特定細(xì)胞具有重要意義。
CCD-18Co細(xì)胞：貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件：90% DMEM高糖、10% FBS
研究組利用他們和氣體研究人員的研究發(fā)現(xiàn)構(gòu)建了這樣的一個(gè)系統(tǒng)。該研究組之前確定出轉(zhuǎn)錄因子PU.1是觸發(fā)骨髓祖細(xì)胞發(fā)育的一個(gè)關(guān)鍵基因開關(guān)。
BJ細(xì)胞：貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件：90% DMEM高糖、10% FBS
氣體的研究人員確定出一個(gè)叫做C/EBPα的轉(zhuǎn)錄因子是另外的一個(gè)發(fā)育開關(guān)。 但是這兩個(gè)開關(guān)如何工作還不清楚。這種轉(zhuǎn)錄因子在巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞中的水平都很高。它們似乎都能直接活化巨噬細(xì)胞或嗜中性粒細(xì)胞的基因。
BGC-823細(xì)胞：貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件：90% RPMI-1640、10% FBS
嗜中性粒細(xì)胞中的巨噬細(xì)胞基因也處于關(guān)閉狀態(tài)。那么，這些巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞基因如何利用相同的一套基本調(diào)節(jié)因子來(lái)產(chǎn)生特定的基因表達(dá)模式呢？
